黄芩苷对小鼠感染H6N6禽流感的治疗效果

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目的:H6N6亚型禽流感病毒具有跨越物种屏障感染哺乳动物的能力,并对人类健康构成潜在威胁。本研究用不同浓度黄芩苷对感染鸭源H6N6亚型AIV的小鼠进行治疗,探究黄芩苷对H6N6亚型禽流感患鼠血液常规指标、组织病理损伤、组织病毒含量、组织中肥大细胞(MC)数量及脱颗粒情况、主要炎性因子等多方面的影响,为黄芩苷治疗低致病性禽流感提供理论依据。方法:通过鸡胚培养试验和血凝试验(HA)筛选出抗H6N6亚型禽流感病毒效果最佳中药。选用6-8周龄小鼠108只,随机平均分为阴性对照组、病毒阳性组、低、中、高黄芩苷治疗组和西药对照组,尾静脉攻毒(0.2 m L·只-1),阴性组注射(灭菌生理盐水)。攻毒3 d后灌胃给药,黄芩苷治疗组(0.014,0.028,0.056mg·只-1·d-1),西药对照组(0.39 mg·只-1·d-1),病毒阳性组、阴性对照组(灭菌生理盐水),分别于治疗后3 d、6 d、9 d(各组每次采取6只小鼠)采用颈静脉放血法处死,采集样品。血液分析仪检测血常规;ELISA方法检测血清中炎性因子含量;HA检测肺脏组织匀浆血凝滴度;肺脏、气管、脾脏制作石蜡组织切片,HE染色观察各组织病理损伤、TB染色观察各组织MC,实时荧光定量PC R测量组织中病毒含量。结果:(1)黄芩汤剂在鸡胚中抗病毒效果最佳(2)治疗3 d、6 d、9 d时高剂量黄芩苷组白细胞总数、中性粒细胞数目均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(3)治疗3 d、6 d和9 d时高剂量黄芩苷组淋巴细胞数目和淋巴细胞百分比均极显著高于病毒阳性组(P<0.01),与西药对照组差异不显著(P>0.05);(4)治疗9 d时,所有剂量黄芩苷组红细胞数目均极显著高于病毒阳性组(P<0.01);在治疗3 d、6 d和9 d时,所有黄芩苷治疗组血红蛋白浓度和平均红细胞血红蛋白含量均极显著高于病毒阳性组(P<0.01),与阴性对照组和西药对照组差异不显著(P>0.05);(5)在治疗3 d、6 d和9 d时所有黄芩苷治疗组血小板数目均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(6)治疗3 d时,高剂量黄芩苷组肺脏系数显著低于病毒阳性组(P<0.05);(7)治疗3 d时,高剂量黄芩苷组肺脏病理评分显著低于病毒阳性组(P<0.05),治疗6 d、9 d时,高剂量黄芩苷组肺脏病理评分均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(8)治疗3 d、6 d、9 d时,高剂量黄芩苷组血凝滴度均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(9)治疗3 d、6 d和9 d时,高剂量黄芩苷治疗组肺脏组织病毒含量显著低于病毒阳性组(P<0.05),与西药对照组差异不显著(P>0.05),治疗9 d时,中剂量黄芩苷组、高剂量黄芩苷组肺脏组织病毒含量显著低于病毒阳性组(P<0.05),气管、脾脏组织中各试验组病毒含量差异不显著(P>0.05);(10)治疗9 d时,低剂量黄芩苷组肺脏MC数显著低于病毒阳性组(P<0.05),治疗6 d和9 d时,中剂量黄芩苷组和高剂量黄芩苷组肥大细胞脱颗粒率均显著低于病毒阳性组(P<0.05);(11)治疗6 d和9 d时,低剂量黄芩苷组、中剂量黄芩苷组、高剂量黄芩苷组小鼠血清中IL-1含量均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(12)治疗3 d、6 d、9 d时各浓度黄芩苷组与病毒阳性组血清中IL-2含量差异不显著(P>0.05);(13)治疗3 d、6 d、9 d时低、中、高剂量黄芩苷组血清中TNF-α含量均极显著低于病毒阳性组(P<0.01);(14)结果显示治疗3 d、6 d、9 d时,中剂量黄芩苷组、高剂量黄芩苷组血清中IFN-γ含量极显著高于病毒阳性组(P<0.01),(15)治疗6 d和9 d时,低剂量黄芩苷组、中剂量黄芩苷组、高剂量黄芩苷组血清中5-HT含量均极显著低于病毒阳性组(P<0.01),中、高剂量黄芩苷组均与西药对照组差异不显著(P>0.05)。全文总结:黄芩苷在对H6N6禽流感病毒引起的炎症中,具有降低病毒在肺脏中的复制,具有降低白细胞总数、抑制出血反应、抑制肺脏中MC脱颗粒反应,调节血清中细胞因子(IL-1、TNF-α、IFN-γ和5-HT)含量,减轻患鼠肺脏组织的病理损伤的作用。
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