山药组织培养技术的研究

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本文以龙岩大池本地山药品种寸金薯为研究对象,运用植物组织培养技术,在山药多芽体的诱导形成、生根快繁、组培苗移栽、组织培养过程中褐化现象的抑制及无菌繁殖体系的建立等方面进行了试验研究,探讨了在山药植株再生繁殖体系建立过程中的关键技术,为山药组培苗的工厂化繁育提供了技术支撑。本研究结果如下:1、利用寸金薯幼嫩茎段(带节间部)为外植体,以MS为基本培养基,蔗糖浓度为3%,采用6-BA0.5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L的激素组合最适宜山药多芽体的诱导,不仅芽体诱导形成的时间短,且形成的芽体数目较多,芽体饱满有活性。2、在芽体的生根快繁及组培苗的移栽试验中,适宜芽体生根快繁的最佳培养基激素组合为:6-BAO.2mg/L+NAA0.2-0.5mg/L,生成的植株茎蔓健壮、叶色浓绿。组培苗的移栽基质采用珍珠岩与腐质土按1:1比例混合,练苗时间为5d,可提高组培苗移栽成活率。3、山药组培中以零余子切块的外植体褐化现象最为严重,因此,山药品种寸金薯的组织培养中以带节间部的茎段为适宜外植体;在茎段诱导分化出多芽体的培养过程中预先对外植体用100mg/L的VC溶液浸泡30min,有助于提高其对褐化反应的抑制效果;采用150mg/L的PVP溶液能显著降低山药组织培养中的褐化现象,提高多芽体的诱导成活率;山药组培苗的继代快繁阶段可采用未加琼脂的MS培养基,在快繁生长周期内,因液体溶液能使有毒醌类物质不易形成一个有效作用浓度点,不仅可提高组培苗的生长势及成活率,扩大繁殖系数,而且在山药组培苗工厂化育苗过程中可节约添加琼脂的生产成本。4、往培养基中添加25mg/L的苯甲酸钠溶液可有效降低外植体的污染率,并且不影响外植体的诱导分化率,有助于改善外植体的生长环境,对山药组织培养过程中无菌培养体系的建立起到一定的改善促进作用。
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