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本文研究了长白山、完达山、小兴安岭地区落叶松枯梢病梢栖真菌的群落结构,应用形态学和分子生物学的方法对真菌进行了鉴定,并利用所分离到的真菌筛选出拮抗菌株并进行了林间生物防治试验;以梢栖真菌的序列为基础,针对落叶松枯梢病(Botryosphaeria laricina(Sawada)Y.Z.Shang)设计特异引物,初步探索出了落叶松枯梢病分子检测的方法。(1)用形态学和分子生物学的方法,对落叶松枯梢病病原真菌(B.laricina)进行鉴定,并获取NCBI基因登录号:EU442284。经DNAman比对小兴安岭地区、长白山地区、完达山地区三个地点所获得的菌株,ITS区域相似度为100%。(2)从落叶松病/健康梢上共分离到子囊菌3属(Botryosphaeria、Chaetomium和Sordaria),有丝分裂菌15属。夏季梢栖真菌与冬季梢栖真菌相比,多出7种有丝分裂菌。冬季落叶松枯梢病/健康梢上分离率最高的为Alternaria,Pestalotiopsis,以及Epicoccum,分别为32.2%,21.8%和19%:夏季落叶松枯梢病/健康梢上的优势种类为Alternaria,其次为Tolura和Epicoccum,其分离率分别为32.0%,18.O%和14.0%。3年生病梢上种类略为丰富,而1年生健康枝条上种类相对较少。B.laricina主要分布于1年生梢部;健康及感病未发病的2、3年梢部,均有Chaetomium、Sordaria和Trichoderma出现,各个季节病/健康梢均部有分布的种有:Epicoccum、Alternaria、Trichoderma、Chaetomium和Sordaria,共5属。(3)根据拮抗系数、抑菌率、被覆盖程度和防治预试验的综合评价确定Sordaria fimicola、Trichoderma atroviride和Chaetomium globosum为生防菌。野外防治试验表明,综合比较防治效果为S.fimicola＞代森锰锌400倍液＞T.atroviride＞C.globosum。三种菌剂在50%喷洒浓度时,真菌多样性最大;防治区真菌群落数量明显少于非防治区群落数量;非防治区同期梢栖真菌分离结果显示在健康梢部,分离到大量Trichoderma、Chaetomium,说明在自然界中Trichoderma、Chaetomium本身对B.laricina有较强的抑制作用。(4)通过对落叶松梢栖真菌ITS序列的分析,设计出特异引物ITSA1与ITSB1。该特异引物可以将落叶松枯梢病病原菌与其它9种(属)落叶松梢栖真菌分别开,具有较好的特异性和较高的灵敏性,初步建立了落叶松枯梢病的分子检测方法。