转录因子与顺式作用元件互作参与了众多生物学过程和功能。目前有两种方法研究转录因子与顺式作用元件的互作,即以转录因子研究其识别的DNA序列（TF-centered或者Protein-to-DNA）和以DNA元件研究与其结合的转录因子（Gene-centered or DNA-to-protein）。本研究基于酵母单杂交技术建立了一种以转录因子为中心鉴定其识别作用元件的方法,命名为TF-centered Y1H。在该系统中,首先构建随机DNA文库,再利用酵母单杂交技术筛选文库鉴定转录因子特异性结合的DNA序列。利用该方法,我们发现了拟南芥AtbZIP53转录因子识别的6个DNA序列,包括一个未知的新元件BRS1（bZIP Recognized Site 1）和 5 个己知元件（Dof,G-box,I-box,BS1 和 MY3）。此外,来自 8 个不同亚家族的bZIP成员也能够与这些元件特异性结合,进一步证实了 TF-centered Y1H方法的可靠性。总之,该方法能够准确、高效的鉴定出转录因子识别的元件,在蛋白质与DNA元件的互作研究中有一个广阔的应用前景。NAC（NAM,ATAF1/2和CUC）转录因子是近年来新发现的一类植物特有的转录调控因子,参与了植物生长发育、防御反应及信号传导等多种生理生化过程,在植物抗旱和耐盐中起着重要作用。目前,通过检索已建立的7个刚毛径柳（Tamarix hispida）转录组的蛋白功能注释信息,共鉴定出89条NAC家族基因,包括21条全长ORF（Open Reading Frame）基因,命名为ThNAC1-ThNAC21。序列分析显示这21条ThNAC蛋白中,大部分都包含一个高度保守的N端NAC结构域和一个高度多样化的C端转录激活域;根据与拟南芥NAC蛋白的系统进化关系和分子结构特征,预测了部分ThNACs蛋白的生物学功能,尤其耐盐响应基因;实时定量RT-PCR结果显示,在盐、干旱、重金属胁迫以及脱落酸（ABA）处理时,这些ThNACs基因在柽柳的根、茎或者叶中都有不同程度的表达,表明它们参与了不同的非生物胁迫响应过程,并在ABA信号转导途径中可能充当着重要的角色。根据对21条柽柳ThNACs基因的分子特征和逆境下的表达模式分析结果,推测ThNAC13基因可能在柽柳的抗逆过程中起着重要的作用。首先,我们克隆了 TANC13基因,发现ThNAC13蛋白是一个核定位蛋白;利用酵母双杂交系统分析了 ThNAC13的转录自激活活性,其转录激活区位于C端的227-373氨基酸区段。酵母单杂交分析结果显示ThNAC13蛋白也能与含有核心序列“CGT[A/G]”的NACRS（NAC Recognition Site）顺式作用元件特异性结合,同时利用TF-centered Y1H技术筛选到ThNAC13识别的8个DNA序列;过表达ThNAC13基因能够提高盐、干旱以及ABA胁迫下转基因拟南芥种子的萌发率,其根长和鲜重也明显优于野生型拟南芥。组织化学染色方法和生理指标测定结果显示,ThNAC13基因的表达能够显著提高了盐、干旱胁迫下转基因拟南芥和柽柳的活性氧（ROS）清除能力,降低了叶片细胞的受损伤程度,提高了转基因拟南芥和柽柳的抗逆能力。