【摘 要】
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促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是一个保守的神经十肽家族,是调节下丘脑—垂体—性腺(Hypothalamic-Pituitary-Gonad,HPG)轴的关键信息分子.在硬
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促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是一个保守的神经十肽家族,是调节下丘脑—垂体—性腺(Hypothalamic-Pituitary-Gonad,HPG)轴的关键信息分子.在硬骨鱼类,下丘脑合成的GnRH直接通过神经轴突末梢作用于垂体前叶的促性腺激素细胞,与其膜上分布的受体结合后刺激垂体合成和释放促性腺激素(gonadotropin,GtH
),进而激活性类固醇激素的生成,调节性腺发育和最后的性成熟;同时性类固醇激素对脑和垂体激素的合成和释放有反馈调节作用.采用反义转基因技术研制表达反义GnRH mRNA的转基因鲤鱼,在脑水平完全和特异的阻断GnRH基因的剪接和表达,GnRH肽的缺失或显著减少将导致HPG轴的阻断,并最终影响转基因鱼的性腺发育和最后的性成熟.性腺发育被抑制的转基因鱼能通过注射垂体抽提物、激素包埋等补充外源激素的方式,诱导其性成熟.鲤鱼(common carp,Cyprinus carpio L.)是我国常见的经济淡水鱼,也是常用于研究淡水鱼类内分泌调节的模式鱼.本研究室从19世纪80年代开始转基因鱼研究,随着对转基因鱼的深入研究,转基因鱼的产业化是一个备受关注的问题,影响转基因鲤鱼产业化最为关键的制约因素是转基因生物的生态安全和遗传安全.本文研究了鲤鱼GnRH肽的类型、基因编码形式和GnRH基因在鲤鱼不同发育阶段的表达模式,同时采用反义转基因技术初步研制育性可控的转基因鲤鱼,以期建立一种新的控制转基因鱼生态和遗传安全的技术平台.本研究首次报道了鲤鱼促性腺激素释放激素基因的分子形式和基因编码;sGnRH和cGnRH-Ⅱ基因在鲤鱼基因组共存,并都以多拷贝形式存在.根据GnRH基因的表达检测,构建反义RNA表达载体,并采用反义转基因技术初步研制并获得育性可控的转反义sGnRH基因鲤鱼.采用该方法获得的转基因鱼在生态和遗传方面是安全的,将为转基因鱼的产业化提供了一种新的技术保障.
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