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转移因子作为一种新型免疫增强制剂,能够提高疫苗免疫效果、增强动物机体免疫、提高动物传染性疾病的防治,其在人和动物临床研究和应用越来越广泛。本实验旨在制备出鸡脾脏转移因子,进行相关质量评价,并观察其对肉鸡免疫的影响作用,为其进一步用于临床提供一定研究基础。试验选用10日龄白羽肉鸡,取脾脏除去被膜和脂肪,利用高速捣碎和低温透析方法制备鸡脾转移因子。将所得产品进行性状、pH、茚三酮和钼酸铵鉴别反应、核酸与多肽比值、蛋白质、氨基酸组分等理化性质检查;进行生物安全性、无菌、小白鼠巨噬细胞吞噬功能等生物学特性检查。结果显示,转移因子外观均呈微黄色透明液体,有轻微的腥臭气味;pH值在6.2-6.6之间,茚三酮反应呈紫色,钼酸铵反应析出黄色沉淀;核酸与多肽比值均大于2,产品不含大分子蛋白质;谷氨酸含量最高,平均值31.22±0.82μg/mL,RSD为3.72%;蛋氨酸含量最低,平均值3.00±0.08μg/mL,RSD为3.23%;试验组动物精神、采食等均表现正常,剖检结果无异常;无细菌生长,符合生物制品规定要求;中剂量、高剂量试验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的比例和吞噬指数均显著高于对照组(P<0.05),低剂量组与空白组差异不显著(P>0.05)。试验选用200只肉鸡随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ5个组,每组40只。Ⅰ组正常疫苗免疫;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组在正常免疫基础上,每一只分别腹腔注射0.8mL、1.0mL和1.2mL,Ⅴ组对照组,不进行免疫,并于28日龄时采取滴鼻方式人工感染ND病毒。雏鸡7日龄时采取滴鼻点眼方式接种鸡新城疫克隆苗-传染性支气管炎二联弱毒苗;14日龄时采取饮水免疫方式接种法氏囊多价中毒活苗;21日龄时采取饮水方式接种新城疫Lasota弱毒活苗免疫。试验鸡采用网上平养,试验动物所用饲粮参照NRC(1994)配制,试验周期共42d。检测内容包括:肉鸡平均体重及日增重、肉鸡死亡率、肉鸡免疫器官生长指数、T和B淋巴细胞转化率、HI抗体效价。结果显示,7-28d试验组Ⅲ肉鸡增重最多,平均体重达到1350.6g,平均日增重达到56.6g,28-42d试验组Ⅲ肉鸡增重最多,平均体重达到2286.3g,平均日增重达到66.8g,与组Ⅰ比较和组Ⅴ比较,差异显著(P<0.05);42d后,组Ⅲ肉鸡死亡率仅为3.3%,组Ⅴ肉鸡死亡率急剧增加至40.0%,剖检表现出典型的新城疫致病特征;与组Ⅰ比较,42d时组Ⅲ肉鸡各免疫器官指数差异均显著(P<0.05),组Ⅳ肉鸡脾脏指数差异不显著(P>0.05),胸腺指数差异显著(P<0.05),组Ⅱ各免疫器官指数差异不显著(P>0.05);与组Ⅴ比较,组Ⅰ至组Ⅳ肉鸡各免疫器官指数差异均显著(P<0.05);与组Ⅰ比较,42d时组Ⅲ和Ⅳ肉鸡T、B淋巴细胞转化差异显著(P<0.05),组Ⅱ差异不显著(P>0.05);与组Ⅴ比较,各组肉鸡T、B淋巴细胞转化差异均显著(P<0.05);与组Ⅰ比较,14d时各组HI抗体抗体滴度差异不显著(P>0.05);28d、35d和42d时组Ⅲ和Ⅳ与组Ⅰ差异显著P<0.05),组Ⅱ与组Ⅰ差异不显著(P>0.05)。14-42d,各组与组Ⅴ比较,HI抗体滴度差异均显著(P<0.05)。以上结果表明,所制备鸡脾脏转移因子安全性良好,能降低肉鸡死亡率,促进肉鸡生长,增加肉鸡免疫器官指数,促进T淋巴细胞和B淋巴细胞转化,增加HI抗体滴度,促进肉鸡的细胞免疫和体液免疫功能。本试验还表明,注射高剂量转移因子效果优于低剂量,说明免疫效果和剂量有一定依赖关系,但并非越高越好,每只肉鸡1mL注射量效果最好。