黄连素对人大肠癌耐长春新碱细胞株多药耐药的研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yl1992zhangshu0804
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨黄连素对人结肠癌细胞HCT-8及人结肠癌耐长春新碱细胞HCT-8/VCR的细胞生物学作用和可能的耐药逆转作用。  方法:采用浓度梯度递增法作用耐药细胞株,直至耐药细胞HCT-8/VCR可以长期在浓度为1.25μg/ml的长春新碱的培养基中稳定生长。体外细胞毒性实验观察亲本细胞株HCT-8和耐药株HCT-8/VCR对长春新碱、奥沙利铂、伊立替康及氟尿嘧啶的敏感性,确定 HCT-8/VCR的多药耐药性。比较HCT-8和HCT-8/VCR细胞在细胞形态、生长曲线及倍增时间的差别。MTT法检测黄连素对HCT-8/VCR细胞多药耐药的作用。流式细胞仪检测HCT-8细胞、HCT-8/VCR细胞及黄连素作用后的耐药细胞的细胞周期。  结果:(1)HCT-8/VCR细胞经过长期不同浓度的长春新碱诱导后可在含浓度为1.25μg/mL的VCR的培养基中稳定增殖,而HCT-8细胞在低浓度250ng/ml的VCR中就大片死亡,很难继续生长。(2)以HCT-8细胞为对照组,HCT-8/VCR细胞为实验组,分别加入不同浓度的化疗药,实验检测出 HCT-8/VCR细胞株对长春新碱的耐药指数为16.23,并发现HCT-8/VCR细胞对奥沙利铂、伊立替康及氟尿嘧啶的耐药指数分别为7.29、5.59及4.32,产生交叉耐药,证实HCT-8/VCR细胞存在多药耐药性。(3)耐药细胞HCT-8/VCR增殖速度明显低于亲本细胞HCT-8,细胞耐药后HCT-8/VCR细胞的生长增殖速度减慢,其群体倍增时间较亲本HCT-8细胞延长了27.6007小时。耐药细胞株与亲本细胞HCT-8相比,贴壁较紧,消化时间时间延长,显微镜镜下观察,HCT-8/VCR胞体积较HCT-8大,细胞核不规则,可见双核、多形核,细胞形态不规则,呈多角形、细长形改变,可见巨核细胞。(4)根据MTT检测的实验结果和中效方程式计算黄连素作用HCT-8及HCT-8/VCR细胞的IC50值,两组细胞的IC50值(P>0.05),说明黄连素对HCT-8和HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用在浓度方面无显著性差异,HCT-8/VCR细胞对黄连素无交叉耐药性。经黄连素作用后的黄连素-HCT-8/VCR细胞对化疗药物的耐药性均出现不同程度发生逆转,对VCR的耐药逆转指数最高,为1.8,对奥沙利铂、伊立替康及5-FU的逆转指数为1.4、1.3和0.8。说明黄连素作用后的黄连素-HCT-8/VCR细胞对VCR的耐药性发生了部分逆转。(5)与亲本细胞相比,耐药细胞的GO/G1期所占比例减少,G2/M期所占比例增加;黄连素作用后的耐药细胞与耐药细胞比较, GO/G1期所占比例增加,G2/M期所占比例减少。  结论:(1)人结肠癌耐长春新碱细胞株 HCT-8/VCR,对奥沙利铂、伊立替康及5-FU产生交叉耐药,证实该细胞株是大肠癌MDR的理想模型。(2)黄连素在体外具有抑制人结肠癌细胞HCT-8及其耐药细胞HCT-8/VCR增殖的作用,这种作用具有剂量依赖性。(3)黄连素可以增强长春新碱、奥沙利铂、伊立替康及5-FU对HCT-8/VCR细胞的毒性。(4)黄连素具有部分逆转HCT-8/VCR的耐药作用。
其他文献
数控技术在机械制造领域日益普及与提高,各种类型的数控机床在生产中得到越来越广泛的应用。企业之间的竞争已由物质资源的竞争转化为人力资源的竞争,如何培养高技能人才的问题
一、小麦叶面积系数的测定小麦叶面积系数,是指每亩地的绿色叶面积与土地面积的比值。现介绍两种测定方法: (一)长宽乘积法:选取有代表性的植株20一30株,量出每一叶片的长度
后勤管理的六大理念是后勤工作的方向与目标,做好后勤保障工作意义十分重大。
本课题主要研究已经制好的芭蕉、香蕉茎表皮硫酸盐浆混合打浆工艺,以探究其用于与其他浆料实际配抄应用的可能性。
优良的轮作制度,可以做到用地养地相结合,是农作物连年稳产高产的重要条件。“年花年稻,眉开眼笑”,这种水旱轮作经验,在上海郊区源远流长,卓有成效。而为群众所津津乐道。
第一军医大学附属南方医院,是一所大型现代化综合性医院。南方医院自实施军卫一号工程以来,经过多年建设,军卫网已形成较大规模,目前的业务基本依赖于军卫一号工程系统。 N
水稻是我国的第一大粮食作物,尤其是在南方地区,水稻生产对保障我国粮食安全有着重要意义,因此,水稻的栽培也越来越引起重视。本文从多个方面对南方地区水稻高产栽培技术进行了分
纯博送来小楷书稿,命我作序。书法我是外行,作序更是强我所难,但近年常与纯博雅聚后海,对京剧艺术的共同爱好,使我对这位年轻人多了几分认识。他身处传媒行业,仍葆淡泊之心,
期刊