论文部分内容阅读
本文研究目的：1、观察二甲基氨氯吡咪(DMA)对正常大鼠不同部位动脉血管环的作用并探讨药物可能的作用机制。2、观察二甲基氨氯吡咪对正常大鼠和心肌肥厚大鼠心室肌细胞离子通道及Na<+>/Ca<2+>交换的影响。
研究方法：1、大鼠脱臼后，立即取出肠系膜、肾脏、心脏和大脑，浸入4℃的PSS液中。按不同方法分离制备出2mm长的动脉环，将两根直径为40μm的钨丝穿入管腔，把血管环固定在Multi Myograph System-610M(Danish Myo Technology A/S，DMT)浴槽内的传感器上，持续通以100％O<,2>。浴槽温度恒定在37℃，平衡60min后开始实验，血管环的张力变化通过DMT的换能系统采集，并通过Chart5.3记录在微机上。2、采用L-甲状腺素(L-Thy)给大鼠灌胃，连续给药7天，最后一次给药24小时后取出心脏，测其心脏重量指数和心室重量指数，两项指标与空白对照组相比均有统计学意义(P<0.01，n=10)，符合《药理实验方法学》中的心肌肥厚模型标准，证明心肌肥厚模型制备成功；胶原酶法急性分离正常和心肌肥厚大鼠心室肌细胞；采用膜片钳全细胞记录方法测定细胞的L-型钙电流、钠电流和钠钙交换电流，膜电流大小以电流强度表示。
研究结果：
1、二甲基氨氯吡咪对正常大鼠不同部位动脉血管环的作用：DMA(1×10<-6>、3×10<-6>、1×10<-5>、3×10<-5>mol/L)各浓度对由60 mmol/L KCl引起大鼠大脑中动脉、冠状动脉、肾动脉和肠系膜上动脉血管环收缩的影响均小于5％，与对照相比，没有显著差异(n=5，P>0.05)。DMA(3×10<-7>、1×10<-6>、3×10<-6>和1×10<-5>mol/L)浓度依赖性抑制由：Phe引起的大鼠肾动脉血管环收缩，使Phe浓度一效应曲线非平行右移，Emax降低20％～45％左右，表现出非竞争性拮抗的特点。DMA(3×10<-7>、1×10<-6>、3×10<-6>和1×10<-5>mol/L)浓度依赖性抑制由Phe引起的大鼠肠系膜上动脉血管环收缩，使Phe浓度-效应曲线非平行右移，Emax降低20％～50％左右，也表现出非竞争性拮抗的特点。1×10<-6>、3×10<-6>、1×10<-5>、3×10<-5>、6×10<-5>mol/L的DMA，可以使Phe(10<-5>mol/L)收缩的大鼠肾动脉环产生浓度依赖性舒张作用，其最大舒张率(Emax)为：45.75±1.89％(P<0.05，n=6)，其IC<,20>为：6.61±1.65μmol/L(P<0.05，n=6)，等摩尔浓度的NaCl对大鼠肾动脉血管环的张力无显著影响。1×10<-6>、3×10<-6>、1×10<-5>、3×10<-5>、6×10<-5>mol/L的DMA，可以使Phe(10<-5>mol/L)收缩的大鼠肠系膜上动脉环产生浓度依赖性舒张作用，其最大舒张率(Emax)为：47.04±1.42％(n=6，P<0.01)，其IC<,20>为：5.25±1.36μmol/L(P<0.05，n=6)，等摩尔浓度的NaCl对大鼠肠系膜上动脉血管环的张力无显著影响。
2、二甲基氨氯吡咪对正常大鼠和心肌肥厚大鼠心室肌细胞离子通道及Na<+>/Ca<2+>交换的影响：10μmol/L的DMA对正常和L-甲状腺素所致心肌肥厚大鼠心室肌细胞的I<,Ca-L>与I<,Na>均没有显著影响(P>0.01，n=5)。10μmol/L的DMA可以增大Ni<2+>敏感性I<,Na/Ca>，在电位+70 mV的外向I<,Na/Ca>电流强度由106.89±8.54pA增加到135.10±13.71 pA(P<0.05，n=4)，增加了26.18±3.76％：在电位-70 mV的内向I<,Na/Ca>电流强度由-122.70±11.42pA增加到-176.27±14.92 pA(P<0.01，n=4)，增加了43.76±10.91％。20μmol/L的DMA增大I<,Na/Ca>，在电位+70 mV的外向I<,Na/Ca>电流强度由106.89±8.54pA增加到183.31±15.02％(P<0.01，n=4)，增加了71.47±1.60％。在电位-70 mV的内向I<,Na/Ca>电流强度由-122.70±11.42pA增加到-256.90±17.19pA(P<0.01，n=4)，增加了109.77±5.75％。
研究结论：
1、DMA(1×10<-6>、3×10<-6>、1×10<-5>和3×10<-5>mol/L)各浓度对由60 mmol/LKCl引起大脑中动脉、冠状动脉、肾动脉和肠系膜上动脉血管环收缩均没有显著作用。
2、DMA(3×10<-7>、1×10<-6>、3×10<-6>和1×10<-5>mol/L)浓度依赖性抑制由Phe引起的大鼠肾动脉和肠系膜上动脉血管环收缩。
3、DMA(3×10<-7>、1×10<-6>、3×10<-6>和1×10<-5>mol/L)浓度依赖性舒张由1×10<-5>mol/L Phe收缩的大鼠。肾动脉和肠系膜上动脉血管环。
4、DMA(5μmol/L)对于正常和L-Thy所致心肌肥厚大鼠心室肌细胞的I<,Ca-L>和I<,NA>均没有明显作用。
5、10μmol/L DMA和20μmol/L DMA，能增强L-Thy所致心肌肥厚大鼠心室肌细胞的I<,Na/CA>电流；对内向电流的增强作用明显大于对外向电流的作用。