去肾交感神经术对自发性高血压大鼠下丘脑p38MAPK、p65NFκB信号通路的影响

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背景高血压发病率居高不下,其与心血管不良事件的高发生率及死亡率相关。交感神经系统活性亢进在高血压进展中起重要作用,因此抑制增强的交感神经活性是高血压治疗的靶点之一。去肾交感神经术(RDN)作为高血压非药物治疗的一种新手段,通过选择性阻断肾动脉外膜的交感神经,降低交感神经活性达到降低血压的目的。此外,研究证实去肾交感神经术可使左室肥厚、慢性心功能衰竭、慢性肾病、代谢性疾病等其他高交感神经活性疾病获益。然而去肾交感神经术的中枢机制及其介导的信号通路尚不清楚。目的本研究通过对自发性高血压大鼠(SHR)行去肾交感神经术,观察去肾交感神经术后下丘脑血管紧张素II(AngII)、血管紧张素II 1型受体(AT1R)、p38MAPK、p65NFκB等表达的变化,探索去肾交感神经术对血管紧张素系统及MAPK、NFκB信号通路的作用,研究去肾交感神经术降低血压的中枢机制。方法健康成年SHR大鼠36只(雄性、体重250-290g)。采用简单随机化分组法随机分为3组:SHR空白组、手术组及假手术组,每组12只。12只相同周龄的WKY大鼠作为基线对照组(WKY组,n=12)。所有动物均于实验前2周购进适应性喂养至12周龄,采用大鼠智能无创血压计经尾动脉测量血压后采血,于12周龄时首先处死WKY组及第一批SHR大鼠即SHR空白组(n=12),并留取肾脏、下丘脑组织;并于12周龄时,对剩余SHR大鼠行去肾交感神经术或者假手术。于手术或假手术后1周处死第二批SHR大鼠(13周龄时),分别作为去肾交感神经术后1周处死组(D1组,n=6)、假手术后1周处死组(S1组,n=6);采血并留取肾脏、下丘脑标本。继续每周测量大鼠血压、心率及体重,于手术或假手术后6周处死第三批SHR大鼠(18周龄时),分别作为去肾交感神经术后6周处死组(D6组,n=6)、假手术后6周处死组(S6组,n=6);采血并留取肾脏、下丘脑标本。通过ELISA方法检测血浆S100B、NSE含量,肾脏NE含量及下丘脑AngII含量。Westem-Blot方法检测下丘脑p38MAPK、p-p38MAPK、p65NFκB蛋白相对表达水平。实时定量PCR方法检测下丘脑AT1R、p38MAPK的基因表达。结果1.在心率、体重方面,SHR空白组与WKY组比较无统计学差异(均p>0.05);在血压方面,SHR空白组较WKY组明显增高(均p<0.05);在肾脏NE、血浆NSE及S100B、下丘脑AngII含量及下丘脑AT1R、p38MAPK、p-p38MAPK、p65NFκB蛋白、基因表达方面,SHR空白组较WKY组明显增高(均p<0.05)。2.在心率、体重方面,去肾交感神经术组与同期假手术组相比无统计学差异(均p>0.05);在血压方面,D1组较S1组、SHR空白组明显降低(均p<0.05);D6组较D1组明显增高(均p<0.05),且D6组与S6组相比无统计学差异(均p>0.05)。3.在血浆NSE、S100B方面,D1组较S1组、SHR空白组明显升高(均p<0.05);D6组与S6组相比无统计学差异(均p>0.05)。4.在肾脏NE、下丘脑AngII含量及下丘脑AT1R、p38MAPK、p-p38MAPK、p65NFκB蛋白及mRNA表达方面,D1组较S1组、SHR空白组明显降低(均p<0.05);上述各项指标在D6组仍明显低于S6组(均p<0.05);但D6组已明显高于D1组(均p<0.05),且D6组与SHR空白组相比无统计学差异(均p>0.05)。结论1.去肾交感神经术可以在短期内有效的降低自发性高血压大鼠的收缩压及舒张压;2.去肾交感神经术可以降低自发性高血压大鼠肾脏NE含量;3.去肾交感神经术可以增加自发性高血压大鼠血浆NSE、S100B含量;相关性分析示血浆NSE、S100B与肾脏NE呈负相关;4.去肾交感神经术可以抑制中枢肾素-血管紧张素系统;5.去肾交感神经术可以抑制p38MAPK、p65NFκB信号转导通路,共同参与RDN的中枢降压。
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