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(-)-羟基柠檬酸[(-)-hydroxycitricacid]是藤黄果提取物的主要效应成分,其主要以无机盐或内酯的形式存在于藤黄果果壳中。(-)-HCA主要通过竞争性地抑制胞液中柠檬酸裂解酶的活性,在线粒体外抑制柠檬酸裂解为草酰乙酸和乙酰辅酶A,减少胞液中乙酰辅酶A供给而抑制机体脂肪的合成。虽然已经有大量文献表明,藤黄果提取物在减肥、抑制食欲等方面具有良好功效,但其具体的生物化学机制还不是完全清楚,特别是有关(-)-HCA对机体能量代谢和氨基酸代谢的影响研究还鲜有报道。本研究以雄性SD大鼠为研究对象,探讨在不同能量水平的日粮中添加(-)-羟基柠檬酸对大鼠体增重、糖代谢和血清及组织中氨基酸谱的影响,旨在从能量代谢和氨基酸代谢的角度阐明(-)-羟基柠檬酸发挥效应的生物化学机制,同时也为(-)-羟基柠檬酸在控制体重、降脂方面的生物学功能提供新的实验依据。1.普通日粮中添加(-)-羟基柠檬酸对大鼠糖代谢及氨基酸谱的影响为了研究(-)-羟基柠檬酸对大鼠糖代谢及部分组织氨基酸谱的影响,本试验以60只雄性SD大鼠为对象,随机分为四组:对照组组,低剂量组,中剂量组和高剂量组,每组15只。各试验组饲料中添加0,1000,2000和3000 mg/kg的(-)-HCA,饲养8周后处死采样。试验结果表明,与对照组比较,(-)-HCA可以显著降低大鼠体增重及肝脏的相对重量,同时可以显著提高大鼠的饲料转化率,而对大鼠的日采食量无明显影响。与对照组相比,血糖含量无明显变化;低剂量(-)-HCA处理可显著升高肝糖原和肌糖原的含量。高剂量(-)-HCA处理可极显著降低肝脏中己糖激酶的活性,同时3个(-)-HCA处理组中丙酮酸激酶的活性均显著低于对照组。与对照组比较,低剂量和中剂量(-)-HCA处理可显著升高血清中T4的含量,低剂量(-)-HCA处理可以显著升高血清中T3和瘦素的含量,中剂量和高剂量(-)-HCA处理可显著升高血清中胰岛素的含量,而3个剂量(-)-HCA处理组中胰高血糖素的含量均无显著变化。同时,3个剂量(-)-HCA处理组肝脏中和肌肉中蛋白质含量均显著高于对照组。血清中氨基酸谱分析表明,(-)-HCA处理可以升高血清中大部分氨基酸的含量在生糖氨基酸中,中剂量(-)-HCA处理可以显著升高Thr的含量,高剂量(-)-HCA处理可以显著升高血清中Thr、Arg、Ala和Val的含量;在芳香族氨基酸中,高剂量(-)-HCA处理可以显著升高血清中Tyr和Phe的含量;在支链氨基酸中,高剂量(-)-HCA处理可显著升高血清中Val和Leu的含量。肝脏组织中氨基酸谱分析表明,(-)-HCA处理可以显著升高肝脏中大部分氨基酸的含量。在生糖氨基酸中,低剂量(-)-HCA处理可以显著升高Asn和Thr的含量,高剂量(-)-HCA处理可以显著升高Asp、Glu、Thr和Val的含量;在芳香族氨基酸中,低剂量(-)-HCA处理可以显著升高Trp和Phe的含量;在支链氨基酸中,3个(-)-HCA处理均可升高Ile的含量,同时高剂量(-)-HCA处理可以显著升高Val和Leu的含量。肌肉组织中氨基酸谱分析表明,(-)-HCA可以显著降低肌肉中大部分氨基酸的含量。在生糖氨基酸中,3个(-)-HCA剂量均可显著降低Glu的含量,低剂量(-)-HCA物处理可以显著降低Val和Gln的含量,中剂量(-)-HCA处理可以显著降低Asp的含量;在芳香族氨基酸中,低剂量(-)-HCA处理可以显著降低Tyr和Phe的含;在支链氨基酸中,低剂量(-)-HCA处理可以显著降低Val的含量,中剂量和高剂量(-)-HCA处理可以极显著降低Leu的含量。结果提示,(-)-HCA通过对糖代谢相关激素的影响,增加机体能量的消耗,达到降低体重的目的。同时,(-)-HCA可以通过改变氨基酸的代谢途径促进大鼠组织中蛋白质的合成。2.高脂日粮中添加(-)-羟基柠檬酸对大鼠糖代谢及氨基酸谱的影响为探讨藤黄果提取(-)-羟基柠檬酸对高脂日粮诱导大鼠糖代谢及部分组织器官中氨基酸谱的影响,本试验选用95只雄性SD大鼠随机分成5组:普通日粮对照组,高脂日粮对照组,高脂日粮添加(-)-羟基柠檬酸低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只。高脂日粮组分别于日粮中添加相当于(-)-HCA的剂量为0,1000,2000,3000 mg/kg的藤黄果提取物,饲养8周后采集静脉血,分离血清,取肝脏、腿肌等样品。试验结果表明,与普通日粮对照组比较,高脂日粮对照组中,大鼠体增重和BMI均极显著升高,提示本试验中所用高脂日粮能诱导大鼠发生肥胖。与高脂日粮对照组比较,3个剂量的(-)-HCA均可以极显著降低大鼠体增重、相对肝重、BMI和Lee’s指数,而中剂量和高剂量(-)-HCA处理组中平均日采食量显著升高。与高脂日粮对照组比较,(-)-HCA对大鼠血糖含量并没有显著影响,而肝糖原和肌糖原含量在低剂量和高剂量(-)-HCA处理组中显著升高。与高脂日粮对照组比较,高剂量(-)-HCA处理可以显著升高血清中T3和T4的含量;低剂量(-)-HCA处理可以显著升高血清瘦素的含量;低剂量和中剂量(-)-HCA处理可显著降低胰高血糖素的含量;而肝脏组织中总蛋白的含量在低剂量和高剂量(-)-HCA处理组显著升高,同时肌肉组织中总蛋白质的含量在中剂量和高剂量(-)-HCA处理组显著升高。与高脂日粮对照组比较,3个剂量(-)-HCA处理均可显著升高血清中生糖氨基酸Asp、Ser和Gly的含量,可显著升高血清中支链氨基酸Ile的含量,同时可以显著升高血清中芳香族氨基酸Trp的含量;3个剂量的(-)-HCA处理均可极显著降低肝脏中生糖氨基酸Asn、Gly、Thr和Ala的含量,可显著降低肝脏中Tyr、Trp、Phe的含量,但对肝脏中支链氨基酸的含量并无显著性影响;3个剂量的(-)-HCA处理均可以显著降低腿肌中Asp、Glu、Asn、Ser、Gly、Val、Thr和Ala的含量,可以极显著降低腿肌中支链氨基酸Val、Ile、Leu的含量,可以极显著降低Phe的含量。以上结果表明,(-)-羟基柠檬酸通过改变大鼠血清中激素的含量、降低肝脏和肌肉中生糖氨基酸的含量,提高机体糖代谢的水平,达到抑制大鼠体重增加的效果。