论文部分内容阅读
卵巢癌是女性常见的生殖系统肿瘤,其中上皮源性卵巢癌占绝大多数,其临床早期诊断较困难,缺乏有效治疗手段,预后往往不佳。卵巢癌的病因和发病机制迄今仍未完全阐明,由于缺乏有效的预后诊断指标,卵巢癌的诊治效率被大大限制。所以,寻找具有预后指导意义的分子靶标,成为当今卵巢癌研究的热点之一。现代分子病理学技术的发展,为卵巢癌的临床病理研究提供了新的思路。胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一种IL-7样细胞因子,从小鼠胸腺基质细胞系培养上清液中被分离鉴定,最初被认为是一种淋巴细胞生长因子。新近研究提示,TSLP能将机体与外界环境交界的屏障(皮肤、气道、肠道、眼组织等)免疫与Th2细胞免疫应答反应联系在一起。最新报道指出,TSLP在包括乳腺癌、宫颈癌、胰腺癌、胃癌、霍奇金病等恶性肿瘤的发生发展中也发挥了关键的作用。卵巢癌的肿瘤免疫状态由Th2细胞反应占主导,考虑到TSLP在Th2型免疫反应中发挥的重要作用,我们推测TSLP可能参与卵巢癌的发生发展,并且可能是卵巢癌的生物标记物,甚至是临床预后判断的关键靶点。本研究旨在分析TSLP作为一种潜在的分子标记物在卵巢癌诊断和预后判断的价值,为卵巢癌的临床评估提供一种新的思路,并为进一步探索TSLP在卵巢癌发生发展过程中扮演何种角色,以及是否可以成为卵巢癌潜在治疗靶点做前期的铺垫。研究目的:通过评价TSLP在上皮性卵巢癌细胞系和临床患者卵巢癌组织中的表达,统计分析TSLP的表达与卵巢癌患者的临床病理学参数,确定TSLP与卵巢癌患者的预后关联,判断TSLP在上皮性卵巢癌的诊断和预后方面的价值,也为进一步的临床转化和相应机制研究打下基础。研究方法1.培养人上皮源性卵巢癌(EOC)细胞系SKOV3和HO8910以及永生化卵巢上皮细胞系IOSE386,提取上述细胞系的RNA并逆转录为c DNA,实时定量PCR检测并比较细胞TSLP的基因表达水平。酶联免疫吸附测定细胞系培养上清TSLP浓度。2.收集27例卵巢癌手术患者的新鲜癌组织及邻近癌旁样本,提取RNA逆转录为c DNA,实时定量PCR检测并比较卵巢癌组织和邻近正常组织的TSLP的基因表达水平。3.收集144例原发性上皮性卵巢癌(包括多种组织学类型)、25例卵巢良性肿瘤、38例卵巢交界性肿瘤,以及25例具有正常卵巢和29例输卵管石蜡标本,随访并详细记录多项临床病理学参数。制作上述标本的组织芯片,行免疫组化,检测TSLP的蛋白表达水平,统计学分析TSLP的表达与患者的临床病理学参数的相关性,生存曲线分析TSLP表达与患者预后情况之间的关系。研究结果:1.TSLP m RNA和蛋白水平在两种人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3和HO8910中较卵巢上皮细胞系IOSE386表达显著增高(P<0.01),两种人上皮性卵巢癌细胞系间TSLP的m RNA和蛋白水平也有显著性差异。2.与邻近正常组织相比,卵巢癌组织中TSLP基因水平显著增加(P<0.001)。3.与正常卵巢/输卵管及卵巢良性病变相比,EOC中TSLP的表达显著升高,有明显统计学差异(P<0.01)。4.EOC中TSLP高表达与初诊年龄(P=0.009)、组织学类型(P=0.022)、FIGO分期(P<0.001)、组织分化程度(P=0.015)、盆腔肿瘤转移(P<0.001)及淋巴道转移(P=0.034)显著相关。5.完成随访,绘制EOC患者总生存期与无病生存期的Kaplan-Meier生存曲线,与TSLP低表达组相比,TSLP高表达组的患者总生存期及无病生存期均显著缩短,P<0.001。单因素分析结果提示,TSLP高表达、初诊年龄、FIGO分期、组织分化程度、盆腔转移、淋巴道转移均与EOC患者的预后显著相关(P<0.05);多因素Cox比例风险模型分析结果提示,在上述预后相关单风险因素中,仅TSLP高表达与盆腔转移为EOC患者预后的独立预测风险因素。研究结论:1.TSLP在EOC细胞及临床手术标本中表达显著。2.TSLP高表达与EOC相关的临床病理学参数显著相关。3.TSLP高表达是EOC预后判断的独立风险因素。4.综上所述,TSLP可能成为EOC潜在的诊断及预后生物标记物,并可能作为EOC的免疫治疗靶点。