猪体细胞核移植电融合参数的研究

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:terrychang2009
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为确定猪体细胞核移植中适宜的电融合参数,本研究用体外成熟46小时的猪卵母细胞为核移植受体,猪颗粒细胞为核移植供体,共进行了四个实验。 实验一探讨了电脉冲强度对电融合效果的影响,结果发现,0.77kv/cm组的融合率(59.3%)明显高于1.54kv/cm组(38.6%)(P<0.05),但其分裂率(77.8%)及桑椹胚/囊胚发育率(33.3%)与1.54kv/cm组(75.0%,31.3%)差异不明显(P>0.05),仅显著高于2.31kv/cm组(52.2%,13.6%)(P<0.05)。实验二研究了电脉冲时间对电融合效果的影响,结果脉冲时间为20μs组的融合率(68.0%)明显高于30μs组和40μs组(42.7%和35.5%,P<0.05);脉冲时间为20μs的分裂率(89.3%)和桑椹胚/囊胚发育率(24.2%)与30μs组(87.2%,23.4%)没有显著差异(P>0.05),但其分裂率明显高于脉冲时间为40μs组(60.5%)。实验三探讨了脉冲次数对电融合效果的影响,结果发现,脉冲次数为1的处理组融合率(72.8%)明显高于脉冲次数为2的处理组(56.0%)(P<0.05),但两组的卵裂率和桑椹胚/囊胚发育率没有显著差异(P>0.05)。实验四研究了交流电对电融合效果的影响,结果发现,在直流电脉冲前是否施加交流电(1.0v)对融合率(70.0% vs 76.0%),分裂率(77.3% vs 75.0%)以及胚胎发育率(17.3% vs18.4%)均无显著影响(P>0.05)。 以上实验结果表明:在本实验室条件下,猪体细胞核移植中的适宜电融合参数为:0.77kv/cm,20μs,电脉冲1次。
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