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目的:本研究通过前期筛选试验得到了一个能显著负调控RNA病毒诱导Ⅰ-IFN表达的分子—程序性细胞死亡因子10（PDCD10）,且该分子在调控Ⅰ-IFN信号转导方面的生物学功能未被报导,为了进一步揭示RNA病毒感染诱导的Ⅰ-IFN信号转导的调控机制,故进行了以下试验:方法:首先,本文参照《分子克隆》的方法构建了PDCD10的真核表达载体;接着,过表达PDCD10,Luciferase报告基因试验检测IFN-β启动子的激活,Western blot试验检测Ⅰ-IFN信号通路节点分子TBK1和IRF3的磷酸化水平,qPCR试验检测Ⅰ-IFN信号通路节点分子及下游ISGs的转录;紧接着,沉默PDCD10,Luciferase报告基因试验检测IFN-β启动子的激活,Western blot试验检测Ⅰ-IFN信号通路节点分子TBK1和IRF3的磷酸化水平,qPCR试验检测Ⅰ-IFN信号通路下游ISGs的转录;其次,利用敲除PDCD10的细胞与野生型细胞以及敲除回复试验,利用qPCR试验检测Ⅰ-IFN信号通路下游ISGs的转录;进一步,利用Luciferase报告基因试验筛选PDCD10作用的节点分子,同时利用CO-IP试验验证PDCD10是否与RIG-Ⅰ有相互作用,并且利用Western blot试验探究过表达、沉默以及敲除PDCD10对RIG-Ⅰ表达情况的影响;最后,利用口蹄疫病毒进行病毒效应试验。结果:1.过量表达PDCD10后,由SeV以及Poly（I:C）导致的IFN-β启动子以及NF-κB的激活显著被抑制,且这种抑制效果呈现剂量关系。过表达PDCD10显著抑制SeV诱导的TBK1和IRF3的磷酸化;过表达PDCD10显著抑制Ⅰ-IFN信号通路节点分子RIG-Ⅰ、MDA5、VISA、TBK1的转录,但对IRF3和STING的转录没有影响;感染SeV,过表达PDCD10显著抑制Ⅰ-IFN下游ISGs IFNB、ISG20、ISG54、ISG56、CXCL10、RANTES的转录;用核酸模拟物Poly（I:C）刺激条件下,过表达PDCD10显著抑制Ⅰ-IFN下游ISGs IFNB、ISG56、CXCL10的转录。2.沉默PDCD10显著增强SeV诱导的TBK1和IRF3的磷酸化;感染SeV,沉默PDCD10显著增强Ⅰ-IFN下游ISGs IFNB、ISG54、ISG56、CXCL10、RANTES的转录。3.感染SeV,与野生型细胞相比,敲除PDCD10显著增强下游ISGs IFNB、ISG56、RANTES的转录;用核酸模拟物Poly（I:C）刺激,与野生型细胞相比,敲除PDCD10显著增强Ⅰ-IFN下游ISGs ISG54、ISG56、CXCL10、RANTES的转录;在敲除PDCD10的Hela细胞中回复PDCD10,用核酸模拟物Poly（I:C）刺激,与敲除组相比,回复PDCD10显著降低Ⅰ-IFN下游ISGs IFNB、ISG56、RNATES的转录。4.PDCD10靶向RIG-Ⅰ发挥调控Ⅰ-IFN信号转导的作用,并且PDCD10与RIG-Ⅰ互作,与对照组相比,过表达PDCD10能降低RIG-Ⅰ的表达;与对照组相比,沉默PDCD10,RIG-Ⅰ的表达量升高;与野生型细胞相比,敲除PDCD10,RIG-Ⅰ的表达量升高。5.猪源IFN-β能显著抑制FMDV的复制;与对照组相比,过表达PDCD10能够促进FMDV的复制;沉默PDCD10,对照组的FMDV复制明显高于试验组。进一步试验发现PDCD10能与FMDV 3A蛋白相互作用;另外PDCD10与3A能分别抑制IFN-β启动子激活,且这种抑制效果呈现协同作用。结论:本研究首次发现并鉴定了一个调控Ⅰ-IFN信号转导的分子PDCD10,并初步揭示了其作用机制。由于RIG-Ⅰ是Ⅰ-IFN信号转导中一个极其重要的分子,因此本研究有助于丰富我们对RLRs介导的细胞抗RNA病毒感染天然免疫应答反应调控机制的认识。同时,本研究还发现PDCD10能够促进FMDV的复制,为探究FMDV利用宿主蛋白有利于自身复制增殖提供了新视角。