【摘 要】
：
目的构建HPV16E6.E7植物双元转化载体用于转化番茄,为研发粘膜免疫疫苗建立基础。以小鼠为模型,研究转基因大豆对生殖系统的毒理作用,评估转基因食品安全性。方法通过NCBI查
论文部分内容阅读
目的构建HPV16E6.E7植物双元转化载体用于转化番茄,为研发粘膜免疫疫苗建立基础。以小鼠为模型,研究转基因大豆对生殖系统的毒理作用,评估转基因食品安全性。方法通过NCBI查询,使用Vector NTI 8.0软件分析并设计密码子优化的HPV16型E6、E7基因的序列,并引入KOZAK序列和SEKDEL内质网滞留六肽及LTB分子佐剂。重叠PCR人工合成目的基因,PCR及测序鉴定后将目的基因酶切后克隆到含有Cre/lox重组系统的pX6双元载体中,构建四个番茄转化载体pX6-LTB-E6-E7, pX6-LTB-E7-E6,pX6-LTB-E6和pX6-LTB-E7。以含有5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因(EPSPS)的转基因大豆喂食雄鼠,以非转基因大豆为对照,喂食120天后提取小鼠睾丸组织基因组,用PCR扩增技术检测睾丸组织中是否存在外源基因：石蜡切片检测睾丸组织,流式细胞术检测不同分裂期的精细胞数量和彗星电泳检测精子细胞的染色质完整性,评估转基因食品对雄鼠生殖系统的安全性。结果成功地人工合成了优化的目的基因,并构建pX6-LTB-E6-E7,pX6-LTB-E7-E6, pX6-LTB-E6,pX6-LTB-E7番茄转化载体。PCR检测喂食转基因大豆的小鼠睾丸组织基因组未发现转基因大豆中的外源基因,与对照组相比石蜡切片经HE染色后在显微镜下观察并未检测到有病理性损伤,流式细胞术检测不同分裂期的精细胞与对照组并无显著性差异,彗星电泳检测喂食组小鼠精子染色质完整性程度并无差异。结论通过重叠PCR技术获得优化全新基因,构建四个转化载体。以雄鼠睾丸为靶器官,进行转基因食品的生殖毒理学的安全评估未发现转基因植物喂食对其产生生殖毒理效应。
其他文献
目的:通过观察“十三鬼穴结合醒脑开窍针刺法”治疗痰浊蒙窍型血管性痴呆的临床疗效,对该针法作出客观性评价,同时分析探讨痰浊蒙窍型血管性痴呆的发病机制及“十三鬼穴结合醒脑开窍针刺法”的作用机理,为日后应用该针刺法治疗痰浊蒙窍型血管性痴呆提供科学依据。方法:将符合纳排标准的60例痰浊蒙窍型血管性痴呆患者,分为治疗组和对照组各30例(采用随机数字表法随机分组)。治疗组采用“十三鬼穴结合醒脑开窍针刺法”治疗
《黄帝内经》是我国中医理论的奠基之作,其本身包含着类似于现代系统论的朴素系统思想。现代系统论随着科学技术的发展,已经具备了相对成熟的理论体系,所以用现代系统论的视角去研究《黄帝内经》,发现其是一个具有极大研究意义的课题。通过对《黄帝内经》的成书背景以及思想渊源的深度分析,得出《黄帝内经》受儒家、道家学说的影响,形成了一种朴素的系统论,但它本身的着眼点并不完全在客观对象的实际联系上,而是一种主观精神
随着全球气候条件的恶化以及环境问题的突出,研究如何开发利用生物可降解材料来减少环境污染、促进可持续发展显得尤为重要。淀粉(Starch)是一种广泛存在于植物体内的天然高分子,具有可再生、生物可降解、生物相容好等特性。由于它的来源丰富、绿色无毒且价格低廉,在工业生产中具有广泛的应用,例如在食品、纺织、造纸等行业。淀粉纳米晶(SNC)是通过酸水解得到的一种新型纳米二维材料,具有高模量、高强度、高结晶度
信息的表示和查找是大多数计算机应用程序的核心。近年来,随着信息技术的发展,计算机网络已经成为人类社会重要的信息基础设施,并强力渗透到各个领域。资源的交互共享促进了
采用热裂解将生物质转化为高品质的生物质炭是提升生物质能源品质的有效途径之一。为了制备热值高,物理性能强的高品位成型生物质炭,本文将废塑料与松木屑混合成型的生物质作为原料,选取最佳成型条件进行热解成炭的实验研究。(1)成型生物质的物理性质受到原料混合比例、成型加热速率、成型终温、成型压力等因素的影响。相同成型加热速率下,成型生物质的松弛密度随着松木屑质量分数的提高,而不断增大。相同混合比例下,成型加
为了能够更好地掌握交通事故的现状和发展趋势,减少交通事故所带来的直接损失和负面的影响。Xie[1]和李[2]中对交通事故问题进行分析与研究,分别是通过建立ARMA和ARIMA模型来
A型流感病毒猪作为流感病毒一类大分支,根据其宿主的不同,又可以分为人流感、禽流感、猪流感、马流感和犬流感等。猪流感在感染猪后,会引起猪的呼吸系统疾病,主要特征是传播
在2012年的《义务教育体育与健康课程标准(2011年版)》中坚持认真贯彻“健康第一”的指导思想,通过拓展训练活动提高学生的运动兴趣。拓展训练最早可追溯到二战时期,一直延续发展到现在,作为一门体育拓展课程,它是一种快乐的学习方式,注重参与者的体验和感悟,能使参与者在潜移默化中成长。拓展训练的核心是以身体锻炼为辅,提升内在为主的理念,增强学生的顽强拼搏意识和团队协作精神,使得学生在身体得到锻炼的同时
目的:通过回顾性分析多个临床研究中心阿瑞匹坦联合托烷司琼及地塞米松预防自体造血干细胞移植(Autologous hematopoietic stem cell transplantation,auto-HSCT)前预处理所致恶心呕吐(Chemotherapy induced nausea and vomiting,CINV)的临床资料,了解阿瑞匹坦的临床疗效及不良反应,为造血干细胞移植过程中CIN
等离子点火技术是一项新型燃气轮机点火技术,具有点火延迟时间短、点火能量高及活化助燃的优点。目前由于等离子发生器阳极寿命较短,直接影响了等离子点火技术的推广。因此,