砷中毒大鼠空肠形态结构及CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞表达的研究

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目的:探讨砷中毒对大鼠空肠形态结构及巨噬细胞标记物(CD68)、白介素-2(IL-2)、CD8、表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)、神经降压素(Neurotensin,NT)阳性细胞的影响。  方法:将60只清洁级SD大鼠分为对照组(0.0 mg/kg)、低砷组(0.4 mg/kg)、高砷组(10.0 mg/kg),分别自由饮用As2O3与蒸馏水配制的染毒水溶液,连续染毒4个月。采用氢化物发生电感耦合等离子发射光谱法测定尿砷、血砷的含量,HE染色、PAS反应观察染砷组大鼠空肠一般形态结构变化,免疫组化SABC法显示CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞,Biomias图象分析软件检测空肠杯状细胞数及平均灰度值、CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞数及平均灰度值,应用SPSS11.5统计分析软件进行统计分析。  结果:1.对照组大鼠进食饮水正常,毛发光泽,精神状态良好;染砷组大鼠毛发粗糙,精神萎靡,易激惹,体重降低。2.高、低剂量染砷组大鼠尿砷、血砷浓度明显高于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。3.HE染色观察,染砷组大鼠空肠部分绒毛不整齐,固有层内有炎性细胞浸润。4. PAS反应观察,杯状细胞数目增多,高、低剂量染砷组杯状细胞计数高于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠杯状细胞灰度值比较,高、低剂量染砷组杯状细胞平均灰度值低于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。5.免疫组织化学 SABC法显示:①三组大鼠空肠 CD68阳性细胞计数比较,高、低剂量染砷组 CD68阳性细胞计数高于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠CD68阳性细胞平均灰度值比较,高、低剂量染砷组 CD68阳性细胞平均灰度值低于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。②三组大鼠空肠IL-2阳性细胞计数比较,与对照组相比,低剂量染砷组IL-2阳性细胞计数增高,高剂量染砷组IL-2阳性细胞计数降低,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠IL-2阳性细胞平均灰度值比较,与对照组相比,低剂量染砷组 IL-2阳性细胞平均灰度值降低,高剂量染砷组 IL-2阳性细胞平均灰度值增高,p<0.05,差异有统计学意义。③三组大鼠空肠CD8阳性细胞计数比较,高、低剂量染砷组CD8阳性细胞计数高于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠CD8阳性细胞平均灰度值比较,高、低剂量染砷组CD8阳性细胞平均灰度值低于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。④三组大鼠空肠 EGF阳性细胞计数比较,高、低剂量染砷组 EGF阳性细胞计数高于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠EGF阳性细胞平均灰度值比较,高、低剂量染砷组EGF阳性细胞平均灰度值低于对照组,p<0.05,差异有统计学意义。⑤三组大鼠空肠NT阳性细胞计数比较,与对照组相比,低剂量染砷组NT阳性细胞计数增高、高剂量染砷组NT阳性细胞计数降低,p<0.05,差异有统计学意义。三组大鼠 NT阳性细胞平均灰度值比较,与对照组相比,低剂量染砷组 NT阳性细胞平均灰度值降低,高剂量染砷组 NT阳性细胞平均灰度值增高,p<0.05,差异有统计学意义。  结论:1、砷可致大鼠空肠结构损伤:空肠部分绒毛不整齐,炎性细胞增多,杯状细胞数目增多及平均灰度值降低。2、砷可致大鼠空肠内 CD68、CD8、 EGF阳性细胞计数增多,CD68、CD8、EGF表达增强,与砷染毒剂量呈正相关。3、低剂量砷可致大鼠空肠IL-2、NT阳性细胞计数增多,IL-2、NT表达增强,与砷染毒剂量呈正相关;高剂量砷可致大鼠空肠IL-2、NT阳性细胞计数减少,IL-2、NT表达减弱,与砷染毒剂量呈负相关。4、砷可影响大鼠空肠相关免疫细胞及EGF、NT阳性细胞。
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