禽滑液囊支原体的分子流行病学调查和耐药基因筛查分析

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滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)又称滑液囊霉形体,属于支原体的一种,其大小介于细菌和病毒之间,是没有细胞壁只有细胞膜且具有自我复制能力的原核微生物。禽滑液囊支原体病是由滑液囊支原体引起的一种传染性疾病,当鸡感染滑液囊支原体后常引起亚临床感染,可陆续发展为呼吸道疾病或传染性滑膜炎,进而导致鸡生长缓慢、跛行明显、产蛋率下降、蛋壳顶端异常(eggshell apex abnormalities,EAA)、免疫力低下。随着鸡群免疫力下降,滑液囊支原体还会和新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒等致病病原混合感染使其死亡率升高,因此对我国以及全球的养禽业造成了潜在的巨大经济损失。本研究通过收集2019~2021年间我国华中地区安徽、河南、湖北三省疑似感染禽滑液囊支原体病的鸡的气管和胸骨黏膜,统计调查了禽滑液囊支原体在我国华中地区鸡群中的感染情况,为建立华中地区流行病学系统更好地提供了理论基础和技术支持。本研究对2019~2021年收集到的样品进行滑液囊支原体分子流行病学调查分析,旨在了解2019~2021年相关地区滑液囊支原体菌株的遗传变异规律并对耐药基因进行筛查探究,掌握了我国安徽、河南、湖北三省近三年滑液囊支原体的感染率。三年间共从上述三个省份收集到237份样品,并分离鉴定出96株滑液囊支原体,感染率在40.5%左右。根据vlh A的高度保守区域进行了基因分型,确定了2株基因型为A型、2株基因型为D型、7株基因型为E型、2株基因型为I型、1株基因型为J型、82株为L型。其中L型菌株是我国的优势菌株,本研究中流行率高达85.4%。抗生素因为使用方便、效果良好,因此我国目前主要通过使用抗生素来控制滑液囊支原体在鸡群中的流行以减少M.synoviae暴发对养禽业所造成的经济损失,然而由于养殖过程中抗生素长期被过度使用导致致病原(主要包括细菌类、支原体类、衣原体类等)耐药性不断产生,为我国抗生素的临床应用和感染控制带来了巨大的挑战。为了使抗生素更好地发挥临床作用也为了减少耐药菌的产生,本研究针对治疗滑液囊支原体经常使用的喹诺酮类、大环内酯类抗生素的耐药基因设计了检测引物,并对分离鉴定出的滑液囊支原体进行耐药基因的筛选扩增,以借助分子诊断方法指导临床更方便迅捷鉴定耐药菌株。本实验中分离株与参考菌株M.synoviae HN01的单核苷酸位点突变和氨基酸替换具有一定的相似性,同时实验结果证明了通过PCR技术指导抗生素敏感型的检测可为滑液囊支原体的防控提供参考。
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