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禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis,RE）是由禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus,REV）引起的一种可使多种家禽和鸟类感染的重要传染病。感染的禽类主要表现为生长迟缓、免疫抑制综合征、致死性网状细胞瘤以及淋巴组织和其他组织出现慢性肿瘤等。REV是禽弱毒疫苗污染中常见的一种外源病毒,可造成生物制品的污染,当被污染的疫苗免疫鸡群后可引起雏鸡免疫抑制和矮小综合征,从而给家禽养殖业造成巨大的经济损失。本研究从疑似REV污染的鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus,IBDV）疫苗毒种中分离鉴定到了一株REV,这是我国首次从这类活病毒疫苗毒种中鉴定到REV污染。为此,我们对所分离到的REV进行了全基因组序列分析,并通过接种1日龄SPF雏鸡观察其致病性。1.IBDV疫苗毒种中REV的分离鉴定按照农业部针对疫苗中外源性病毒污染的检测程序,将某IBDV弱毒疫苗毒种接种SPF鸡后,经检测血清中REV抗体为阳性,怀疑该疫苗毒种中存在REV污染。将该疫苗毒种用IBDV特异性单因子血清进行中和,接种DF-1细胞盲传3代,每代培养7 d,收集细胞上清,并将细胞进行固定。以REV特异性单克隆抗体11B118作为一抗,进行间接免疫荧光（IFA）检测,经鉴定该外源病毒为REV,并命名为IBD-C1605株。本研究是我国从IBDV弱毒疫苗毒种中分离鉴定到REV的首次报道。2.REV分离株的全基因组序列分析以REV感染的DF-1细胞基因组DNA为模板,使用3对合成的引物进行PCR扩增、分子克隆和测序,并将测序结果通过软件DNA Star进行拼接,获得了IBD-C1605株的前病毒全基因组序列,并将序列提交至GenBank,获得其登陆号为KX278301。序列分析结果显示IBD-C1605株基因组全长为8,362 bp,具有典型的复制完整型REV基因组结构。在核苷酸的组成上A、G、T、C所占的比例分别为25.40%、26.08%、22.52%和26.00%。通过MegAlign软件对该分离株与其余16株参考毒株进行同源性比较,IBD-C1605株与各参考毒株核苷酸同源性为94.2%-99.2%,其中与2014年中国广东鸡源分离株GD1210株同源性高达99.2%,与鸭脾坏死病毒SNV株同源性次之,为99.1%。该分离株与马立克病（MD）疫苗污染株MD-2株核苷酸同源性为95.7%,与疫苗分离株FA株的同源性仅为94.2%。在本研究中通过BioEdit、MEGA 5等生物信息学软件绘制基于全基因组核苷酸的遗传进化树,结果表明,IBD-C1605株与GD1210株和SNV株位于同一遗传进化分支上,亲缘关系最近。3.REV分离株对1日龄SPF雏鸡的致病性为了探究该疫苗分离株IBD-C1605株对SPF雏鸡的生长性能和免疫机能的影响,在本研究中,分别以高剂量(2000 TCID50/只)和低剂量(500 TCID50/只)经腹腔注射的方式接种1日龄SPF雏鸡并观察其致病性。结果表明,感染组鸡只增重缓慢,与对照组相比差异显著（P<0.05）;并导致NDV和AIV-H9疫苗免疫后抗体水平的显著下降（P<0.05）;同时对中枢免疫器官的发育呈现显著的抑制作用,与对照组相比,攻毒组脾脏肿大,而胸腺和法氏囊均呈现严重萎缩（P<0.05）。本研究是我国首次对疫苗中污染的REV致病性进行的相关研究,这将有助于我们加深对疫苗中污染REV等外源病毒危害的认识。