运动改善糖尿病足溃疡合并外周动脉病变患者血供及促进糖尿病后肢缺血大鼠血管生成的研究

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目的:1.探讨糖尿病足溃疡(diabeticfootulcer,DFU)合并外周动脉病变(peripheral arterial disease,PAD)患者的运动治疗处方以及对足部血流灌注、溃疡愈合的影响。2.探讨运功干预对糖尿病后肢缺血大鼠毛细血管生成及对缺血骨骼肌血管抑素结合蛋白(Angiomotin)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,从而进一步分析Angiomotin、VEGF在血管生成中的调节作用。方法:一、第一部分:选取60例DFU合并PAD患者随机分为运动组及对照组,运动组患者进行运动治疗培训,保证患者能遵循运动处方完成运动治疗,对照组无运动要求。治疗12周后,比较治疗前后两组患者的ABI、TcPO2、皮温、HbAlc、BMI及12周溃疡愈合率,评价患者对运动治疗的满意度、依从性,并记录治疗中的不良事件。二、第二部分:SD(Sprague Dawley)大鼠128只随机分为四组:正常大鼠、缺血大鼠、糖尿病大鼠、糖尿病缺血大鼠;每组进一步分为运动组16只(Exercise training,ET组)、非运动组16只(Sedentary,SED组)。造模后每组大鼠分别在干预前取材测量相关指标作为基线对照。ET组大鼠进行跑台运动干预,SED组大鼠笼内正常活动作为对照,4周后取血及后肢骨骼肌组织,CD34免疫组化染色观察骨骼肌毛细血管密度,Western blotting方法测定骨骼肌中Angiomotin、VEGF蛋白的表达,ELISA测定血清VEGF水平。结果:一、第一部分:DFU合并PAD患者治疗12周后,两组患者ABI、足部TcPO2、皮温均升高,HbAlc均降低,治疗前后相比P<0.05。运动组TcPO2升高5.25mmHg、皮温升高0.45℃、BMI降低0.69;对照组TcP02升高2.59mmHg、皮温升高0.28℃、BMI升高0.02,两组患者3项指标变化值比较P<0.01。运动组愈合率53.6%,对照组愈合率25.9%,两组比较,P<0.05。患者对于运动治疗的满意度是90%,依从性是94%。两组患者不良事件发生率无统计学差异,且运动组患者不良事件的发生与运动处方无直接因果关系。二、第二部分:1.正常大鼠后肢缺血后出现代偿性的血管生成,表现为缺血骨骷肌毛细血管密度增加,与非缺血骨骼肌相比P<0.001,并伴随有骨骼肌VEGF表达增加P<0.05、p80/p130 Amot比值升高P<0.001。2.糖尿病大鼠缺血骨骼肌代偿性的血管生成能力受到抑制,缺血骨骼肌毛细血管密度与正常缺血大鼠相比P<0.001,并伴随有骨骼肌VEGF表达增加P<0.05、p80/p130Amot比值降低P<0.001。3.糖尿病大鼠运动干预后缺血骨骼肌毛细血管密度增加明显,与非运动糖尿病缺血大鼠相比p<0.001,并伴随有骨骼肌VEGF表达增加P<0.001、p80/p130Amot比值升高P<0.001。4.骨骼肌p80/p130 Amot比值与骨骼肌毛细血管密度之间有线性回归关系(R2=0.686,F=120.171,P<0.05).结论:1.本研究的运动处方可以改善DFU合并PAD患者足部血流灌注、促进溃疡愈合,且具有较高的安全性,患者依从性及满意度较高。2.运动干预促进糖尿病大鼠缺血骨骼肌代偿性的血管生成。在糖尿病大鼠高表达的VEGF不能反映血管生成的活跃状态,p80/p130Amot比值的升高可以反映血管生成的活跃状态。
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