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IFN-α(interferon alpha,IFN-α)是在特定诱生剂的作用下由细胞产生的一种具有生物活性的糖蛋白,可诱导同种动物细胞产生广谱的抗病毒活性。目前已发现近百种疫病能通过动物传染给人,其中很多为病毒性传染病,有些目前尚未发现合适的疫苗和药物来预防和治疗,有些对病毒的生物学特性仍未研究清楚。IFN-α是抗病毒能力最强的干扰素,但无论是医学还是兽医学领域对IFN-α临床应用仍然极为有限,因此开展IFN-α单克隆抗体的研制,为评价机体抗病毒水平以及IFN-α作用机制研究奠定基础,对推动IFN-α在临床上广泛应用具有重要作用。本研究运用杂交瘤细胞技术,以重组猪IFN-α蛋白免疫BALB/c小鼠,无菌条件下制备小鼠免疫脾细胞,与骨髓瘤细胞SP2/0细胞融合,通过通过GST和GST-pIFN-α双重筛选和多次克隆化培养,成功获得了3株能分泌抗IFN-α的单克隆杂交瘤稳定细胞株。用单克隆抗体亚型鉴定试剂盒鉴定其亚型,确定1株单克隆抗体为IgG2a,2株单克隆抗体为IgG2b。将分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株的染色体计数,发现杂交瘤细胞株染色体平均数为92条,而骨髓瘤细胞株染色体平均数仅为66条,从遗传角度证明确实获得了杂交瘤细胞株;杂交瘤细胞腹水和细胞上清经ELISA检测,腹水中3株杂交瘤分泌单抗的效价均可达1:105,而细胞上清的效价可达到1:104;单抗的抗原结合位点分析表明,3株单抗的抗原结合位点基本一致;SDS-PAGE结果显示,3株单抗的重链分子量均在60ku以上,轻链分子量在30ku以上;在杂交瘤细胞的稳定性试验中,3株细胞经3次克隆化培养,细胞上清中的抗体效价均在1:104～1:105之间,说明该3株杂交瘤细胞分泌单抗的能力稳定,具有较好的遗传稳定性。