【摘 要】
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目的:对甲醛固定石蜡包埋(formalin fixed paraffn embedded,FFPE)切片经免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色后提取核酸,并进行基因检测,对其DNA质量、分子检测结果进行评估,旨在探讨针对标本量较少或难以获取的标本在IHC染色之后进行以PCR为基础的相关分子检测以及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridi
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目的:对甲醛固定石蜡包埋(formalin fixed paraffn embedded,FFPE)切片经免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色后提取核酸,并进行基因检测,对其DNA质量、分子检测结果进行评估,旨在探讨针对标本量较少或难以获取的标本在IHC染色之后进行以PCR为基础的相关分子检测以及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测的可行性。方法:收集东部战区总医院2017年06月至2017年12月期间经病理诊断为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)50例、结直肠癌(colorectal cancer,CRC)30例及乳腺癌(breast cancer,BC)75例。NSCLC、CRC每例标本分别连续切取白片12张,随机抽取其中6张切片作为实验组,进行IHC染色后抽提DNA;剩余切片纳入对照组,直接抽提DNA。NSCLC标本进行表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因(kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)以及鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌基因同源体B1(V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B,BRAF)基因突变检测。CRC FFPE标本进行人β连环蛋白(CTNNB1)基因检测,E-钙黏附素(CDH1)甲基化检测。BC每例标本连续切取白片3张,分别用于苏木素伊红染色(hematoxylin eosin,HE)、IHC和FISH检测。随机抽取其中1张切片进行HE染色,剩余2张切片,1张切片作为实验组,进行IHC染色后FISH检测;另1张切片纳入对照组,直接进行FISH检测。结果:NSCLC、CRC标本实验组抽提DNA浓度及纯度与对照组比较,差别无统计学意义(P>0.05)。NSCLC标本实验组中EGFR基因突变率为52%(26/50),KRAS基因突变率为8%(4/50),BRAF基因突变率为2%(1/50);CRC标本实验组中CTNNB1基因突变率为6.7%(2/30),CDH1启动子甲基化发生率为46.7%(14/30)。NSCLC、CRC标本实验组EGFR、KRAS、BRAF、CTNNB1、CDH1基因检测结果和对照组结果具有高度的一致性,结果相比符合率达100%(P=0.000)。BC标本实验组中FISH检测出HER2基因阳性率为25.3%(19/75),阴性率为74.7%(56/75)。实验组和对照组FISH检测结果符合率较高(P<0.001)。BC标本C-erb B-2蛋白表达为(3+)者15例(20%),(2+)者23例(30.7%),(1+)7例(9.3%),(0)者30例(40%)。除去C-erb B-2蛋白表达为(2+)的病例,BC标本实验组IHC检测阳性与FISH的阳性符合率为93.3%(14/15),IHC检测阴性与FISH的阴性符合率为97.3%(36/37),IHC与FISH的检测结果的符合率为96.2%(50/52)。结论:FFPE切片经IHC染色后能够抽提到高质量的DNA,且可用于靶基因的分子分析,是一种标本回收利用的好方法,为稀缺或难以获取的临床样本后续分子检测提供一种可靠的解决办法。
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背景:环状RNA(circRNA)是一类新的内源性非编码RNAs,在各种类型的肿瘤中起着至关重要的作用。然而,关于circRNA参与胃癌(GC)治疗的信息仍然有限。本课题组前期研究显示circ-EIF4G3在胃癌组织中相对于癌旁组织显著升高,并且可以促进胃癌细胞系的增殖和侵袭迁移。在本研究中将进一步探讨circ-EIF4G3促进胃癌增殖和侵袭迁移的具体机制。方法:采用微阵列芯片技术检测si-cir
随着社会不断发展,对电路要求也越来越高,高压断路器弹簧操动机构工作环境较为恶劣,一旦发生断路或短路,弹簧操动机构会受到较大的冲击载荷,冲击载荷具有冲击效应,对结构件的破坏性是不言而喻的;冲击载荷对具有集中应力的结构件破坏性是非常大的,冲击载荷具有瞬时性,大幅度缩短结构件的裂纹萌生及裂纹扩展的寿命,导致结构件的工作时间较短。高压断路器弹簧操动机构结构件受到冲击载荷,可靠性较低,展开相应的疲劳寿命分析
背景:迄今为止对于食管癌手术中清扫淋巴结的数目尚存在较多争议。本文研究了淋巴结清扫数目与食管癌精确分期以及预后之间的关系,并且模拟出食管癌切除术中需要清扫淋巴结的最佳数量。文章采用的研究资料来自美国SEER(Surveillance,Epidemiology and End Results,监测、流行病和最终结果)数据库以及南京医科大学附属肿瘤医院随访数据。方法:有7356名SEER数据库的食管癌
随着PE、PP类的石油基塑料对环境的污染日益严重以及化石资源的有限性,使得生物降解聚合物的研究不断地深入,特别是可再生资源的研究。然而,与一般的合成聚合物性能相当的生物聚合物的研究与开发仍存在很多的问题。淀粉是一种应用广泛的生物高分子材料,以其低廉的成本和良好的生物降解性而倍受关注。由于天然淀粉具有较强的分子间键和分子内键,导致其熔点高于降解温度,从而限制了其加工性能和应用,因此天然淀粉并不是一种
背景:肺癌是全球肿瘤相关死亡最常见的原因。微小RNA(mi RNA)是一类小的非编码RNA,通常在肿瘤中表达失调并发挥肿瘤促进或抑制的双重调控作用。然而,mi R-297在肺癌中的作用机制知之甚少。本研究主要探讨miR-297在肺癌中的表达及其促进细胞增殖和迁移、侵袭功能的作用机制。方法:q RT-PCR检测肺癌细胞系及人正常支气管细胞系中mi R-297的表达情况;下载TCGA数据库的肺癌样本的
目的评价肺动脉血流加速时间、肺动脉血流加速时间/肺动脉射血时间、肺动脉血流加速时间/心率及三尖瓣返流峰流速四种多普勒超声指标评估肺动脉高压大鼠肺动脉压力的准确性。方法41只8周龄,雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为空白对照组(Con组,N=11)和野百合碱组(MCT组,N=30)。Con组:颈部皮下注射二甲基亚砜(2 ml/kg);MCT组:颈部皮下注射MCT(60 mg/kg,2 m
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目的:探讨降钙素原(PCT),白介素17(IL-17)与C反应蛋白(CRP)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并肺动脉高压(PH)患者外周血中的表达水平,探究PCT、IL-17和CRP联合检测对AECOPD合并肺动脉高压患者的相关性和诊断价值。方法:收集2015年8月至2017年2月我院收治的AECOPD患者120例,根据患者是否合并肺动脉高压,将纳入研究的患者分为两组,即单纯AECO
目的:对比分析围绝经期及绝经期子宫内膜息肉(endometrial polyp,EP)的超声表现与病理结果,确定子宫内膜息肉恶性病变的发生频率及预测危险因素。方法:回顾性分析2017年6月至2019年2月于我院经过超声检查结果为子宫内膜息肉,经过病理确诊的279例患者。结果:279例患者病理结果显示:恶性病变子宫内膜癌(7.89%)有22例,其余为良性病变,包括210例为息肉(75.26%),30
在我国高等级公路中服役着大量空心板梁桥。伴随着交通量的不断增加,车辆载重的提升,部分老旧空心板梁桥已不能满足正常使用的要求,存在梁底混凝土开裂、泛白、钢筋锈蚀等病害,其承载能力达不到设计要求,带来了极大的安全隐患。聚氨酯水泥复合材料作为一种新型的桥梁加固材料,具备密度小强度大、耐腐蚀、粘结性强、硬化速度快等突出优点。本文依托山东省交通运输厅科技计划(2017B97)与山东省重点研发计划(2019G