【摘 要】
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茄子(Solanum melongena L.)是我国重要的蔬菜作物,种质资源丰富,果实色泽是其重要经济性状指标。花色苷是光依赖型紫茄果实的主要色素,其合成主要受外界环境和自身遗传机制
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茄子(Solanum melongena L.)是我国重要的蔬菜作物,种质资源丰富,果实色泽是其重要经济性状指标。花色苷是光依赖型紫茄果实的主要色素,其合成主要受外界环境和自身遗传机制调控。本文以花色苷合成光依赖型紫茄“三月茄”为实验材料,分离鉴别了参与茄子花色苷代谢转录调控的关键转录因子Sm TT8。主要研究结果如下:1.利用茄子基因组数据库,通过进化分析和多序列比对分析鉴别出参与茄子花色苷生物合成的b HLH转录因子Sm TT8,正常光照条件下其在茄子不同组织中的表达与花色苷合成结构基因的表达呈正相关。2.利用RNAi和农杆菌介导的遗传转化技术,获得Sm TT8基因特异型沉默株系。在Sm TT8沉默株系中发现,Sm TT8的表达受到抑制后导致花色苷在转基因茄子各组织中的积累受到抑制。3.通过野生型和转基因型茄子果皮的转录组测序(RNA-seq)分析,共鉴定出了2607个差异基因,其中上调的有1316个基因,主要参与光合作用和叶绿素代谢,下调的有1291个基因,主要参与苯丙烷生物合成和类黄酮生物合成。另外,Sm TT8的表达在转基因植株中受到抑制后导致花色苷合成结构基因显著性下调,苯丙烷通路中的Sm HQT和Sm FLS显著上调,木质素合成关键基因Sm CCo AOMT显著下调。4.使用UHPLC-Q-Orbitrap-MS分析差异表达代谢物发现上调的14种差异代谢物主要有氨基酸和氨基酸衍生物,下调的19种差异代谢物主要包括类黄酮。结合转录组结果和表型差异分析,在转基因茄子果皮中检测到的叶绿素含量显著高于野生型,而木质素含量显著降低。5.瞬时过表达Sm TT8和Sm MYB1能诱导烟草叶片中的花色苷大量积累,过表达Sm MYB1也能诱导花色苷的积累,但是含量显著低于共同注射的效果。启动子诱导实验表明,Sm TT8能与Sm MYB1协同激活Sm DFR和Sm ANS的启动子。综上所述,本研究鉴别得到一个参与光依赖型紫茄花色苷生物合成的b HLH转录因子Sm TT8,可与花色苷合成正向调控因子Sm MYB1协同增强花色苷合成结构基因启动子的转录活性,进而促进花色苷的合成。
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