多溴联苯醚（PBDEs）是一类典型的持久性有机污染物（POPs）,常常作为溴化阻燃剂,应用于家具、纺织品、电子和塑料等领域。在高风险区的灰尘、水和空气中都能检测到它们的身影。由于PBDEs具有高亲脂性、半衰期长等特性,它们能够通过食物链富集到人体血液、组织和母乳中,从而对人类健康产生潜在毒性。进入人体后,PBDEs可以在肝P450酶系的作用下,代谢成羟基化物（OH-PBDEs）,并在过氧化物酶的作用下进一步代谢为多溴联苯醌（PBDEQ）。PBDEQ因为具有亲电性,容易与生物体内的一些亲核试剂如DNA、蛋白质等发生迈克尔加成反应。同时,由于醌型结构在体内不稳定,能在半醌自由基的介入下形成氧化还原循环,此过程能产生丰富的活性氧（ROS）。据了解,PBDEQ在体内的毒性比它的母体更高。因此,全面探索PBDEQ暴露下的细胞效应,深入研究细胞如何应对这种毒性效应的抵抗机制,有利于全面理解PBDEs及其代谢物的毒性机制。第一部分:本章节旨在研究PBDEQ在人正常肝细胞（LO2）中诱导蛋白氧化损伤,以及激活泛素-蛋白酶体和自噬-溶酶体系统的抵抗机制。首先,我们根据PBDEQ的化学结构分析了它的理化性质,并且用CCK-8实验检测了它的细胞毒性,发现PBDEQ导致肝细胞的存活率随着剂量时间逐渐减少。接下来,我们考察了PBDEQ对蛋白质的毒性效应。实验结果显示,PBDEQ能减少细胞内还原性蛋白巯基（protein-SH）的含量,并且能导致羰基化蛋白的含量增加,这表明PBDEQ能诱导蛋白质结构发生氧化修饰。接着,通过PROTEOSTAT（?）aggresome探针检测到氧化修饰的蛋白以聚集体的形式存在于细胞中,这个结果在透射电镜下得到了证实。并且,在此过程中,可以观察到内质网和溶酶体等细胞器发生了结构变化,这进一步证实了PBDEQ能引起细胞开启防御机制。随后,通过Western blot实验检测GRP78,ATF4等与内质网应激相关蛋白的表达,结果显示PBDEQ的刺激下蛋白表达增加,说明PBDEQ能引起内质网应激。为了进一步探究内质网应激如何调节受损的蛋白,我们使用内质网激活剂Tm和抑制剂4-PBA进一步观察蛋白氧化损伤的程度。通过评估protein-SH的含量,羰基化程度和蛋白聚集小体数量变化这三个指标,发现激活剂Tm对蛋白损伤的调控影响不大,但抑制剂4-PBA能明显加重蛋白氧化损伤,这说明内质网应激在其中发挥保护作用,但能力有限。据报道,受损的蛋白质大部分被细胞内降解系统清除。这里,我们考察了蛋白酶体系统和自噬溶酶体这两种降解系统的作用,发现这两种降解系统都能被PBDEQ激活,并协同工作,参与受损蛋白的清除。当抑制了这两种降解系统则会加重PBDEQ的毒性。最后,实验发现PBDEQ诱导的蛋白损伤与氧化应激有关,当加入抗氧化剂,N-乙酰半胱氨酸（NAC）,蛋白氧化损伤的程度得到缓解。第二部分:该部分旨在研究PBDEQ对动脉粥样硬化进展的影响,发现PBDEQ能通过CD36受体诱导J774A.1巨噬细胞产生脂质积累,激活NLRP3炎症小体和焦亡。首先,通过检测总胆固醇,游离胆固醇等各项指标,发现PBDEQ能促进细胞内脂质积累,并且通过油红O染色实验也观察到脂滴的形成。接着,通过蛋白和m RNA两个水平上检测到PBDEQ主要通过调节脂质摄取和排出受体来影响脂质积累的过程。这其中,清道夫受体CD36发挥主要作用。进一步研究发现PBDEQ能激活NLRP3炎症小体并诱导J774A.1细胞发生焦亡,这些结论被PI,LDH等实验证实。随后,我们发现使用小干扰RNA沉默CD36可以有效地减弱这些效应,说明脂质积累会影响NLRP3炎症小体和焦亡的过程。最后,我们通过到检测ROS的水平推测PBDEQ可能是通过产生大量ROS,促进脂质积累和激活NLPR3炎症和焦亡。综上所述,我们从两个部分阐述PBDEQ的毒性机制。第一部分主要阐述PBDEQ诱导蛋白氧化损伤的机制并探究了细胞对它的反应机制,这有利于扩展我们对PBDEQ的毒性效应的认识,并为其防治提供信息。第二部分更加侧重PBDEQ对健康与疾病的影响。主要关注于PBDEQ是否影响动脉粥样硬化的进程,发现PBDEQ能诱导J774A.1巨噬细胞发生脂质积累和激活焦亡,这为PBDEQ暴露与动脉粥样硬化之间的关系提供了新的证据。以上两部分丰富了PBDEQ的毒性机制。