槲皮素电控制释放调控细胞生长及有机电化学晶体管阵列制备研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woyaoguo_sanji
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梯度在生物学中起着重要的作用,对梯度参数的主动控制是调节众多生物系统机制和功能的有力工具。电致表面梯度可用来控制物质释放以及细胞、组织的粘附和生长。当在有机电化学晶体管(Organic Electrochemical Transistors,OECTs)源漏极施加电压时,通道中会有一个连续电位梯度。基于此特点,本文利用丝网印刷技术制备了导电碳浆电极并通过旋转涂膜技术制备了基于聚(3,4-乙烯二氧噻吩):聚(苯乙烯磺酸)(PEDOT:PSS)活性层的OECTs器件;然后在PEDOT:PSS活性层上电化学聚合3,4-乙烯二氧噻吩(EDOT)和槲皮素;将此电极作为细胞培养池来培养细胞,通过施加电压以控制槲皮素释放。研究了释放的槲皮素对细胞生长的影响。此外,还研究了OECT阵列的制备和氧等离子清洗对器件性能的影响。主要工作如下:(1)采用丝网印刷技术和旋转涂膜技术相结合的方法制备了基于PEDOT:PSS活性层的OECTs器件;利用循环伏安法(CV)在PEDOT:PSS活性层上聚合EDOT和槲皮素;对槲皮素和EDOT共聚合过程及聚合后所制备电极进行了表征。结合槲皮素标准曲线,计算了不同条件下槲皮素的聚合量。研究了聚合圈数、CV扫描速率和槲皮素浓度对槲皮素聚合量的影响;并对所制备电极的稳定性进行了表征。结果表明:在CV电位范围为-0.2~1.0 V、聚合圈数为30圈、扫速为0.1 V s-1,槲皮素浓度为0.2237μmol m L-1时,槲皮素聚合量最优且所制备的电极稳定性较好。(2)将聚合有PEDOT和槲皮素的OECTs电极制成细胞培养池,用于成纤维细胞(NIH/3T3)的培养。细胞在培养箱中培养24 h后,以聚合有PEDOT或槲皮素+PEDOT的电极作为OECTs源漏极、饱和KCl Ag/Ag Cl电极为栅极,通过施加不同源漏电压(Vds)(或不同栅极电压(Vgs))及不同的时间来控制槲皮素释放。采用MTT法检测电控制槲皮素释放对细胞活性的影响;并利用倒置荧光显微镜观察细胞形态。结果表明:槲皮素对NIH/3T3细胞的生长具有抑制作用。当施加电压Vgs=0.3 V,Vds=-0.4 V,t=720 s时,细胞在电极表面呈明显的梯度生长。(3)采用丝网印刷技术和旋转涂膜技术制备了OECT阵列器件;详细研究了不同的清洗方法,包括丙酮、异丙醇、乙醇各浸泡5 min和氧等离子清洗对所制备OECT阵列器件传输性能、输出性能和稳定性的影响。优化了氧等离子清洗时间和功率等影响因素。结果表明:当栅极为饱和KCl Ag/Ag Cl电极时,用氧等离子清洗机在功率为100W下清洗2 min后,所制备OECT阵列器件的传输性能、输出性能和稳定性较好。
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