【摘 要】
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目的:探究环状RNA circ＿0007142在结直肠癌细胞中的生物学功能以及其发挥作用的机制,阐明其在肿瘤发生发展中扮演的重要角色,为肿瘤的分子靶向治疗提供较好的靶标选择。方法:（1）通过前期实验利用6对结直肠癌及对应癌旁组织制作的环状RNA芯片,得到一系列在结直肠癌中差异表达的circRNAs。综合各生物信息学预测软件结果得到5个其可能作用的microRNAs（miRNAs）及两者的结合位点;
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目的:探究环状RNA circ＿0007142在结直肠癌细胞中的生物学功能以及其发挥作用的机制,阐明其在肿瘤发生发展中扮演的重要角色,为肿瘤的分子靶向治疗提供较好的靶标选择。方法:（1）通过前期实验利用6对结直肠癌及对应癌旁组织制作的环状RNA芯片,得到一系列在结直肠癌中差异表达的circRNAs。综合各生物信息学预测软件结果得到5个其可能作用的microRNAs（miRNAs）及两者的结合位点;（2）通过荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）技术在临床收集的50例结直肠癌及对应癌旁组织中验证差异倍数较大的circ＿0007142的表达量,并分析circ＿0007142的表达量与收集到的患者的临床病理资料的相关性;（3）运用qRT-PCR检测circ＿0007142在人正常结肠上皮细胞（HcoEpic）与人结直肠癌细胞系HT-29、HCT-116、Lovo中的表达水平;（4）在HT-29和HCT116细胞中运用小干扰RNA（Small interfering RNA,siRNA）的方法下调circ＿0007142的表达水平,研究其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;（5）对Arraystar公司基于Target Scan和miRanda网站预测的circ＿0007142作用的5个评分最高的miRNAs通过qRT-PCR和荧光素酶报告基因实验进行验证。结果:（1）circ＿0007142在结直肠癌组织中高表达,其结果与芯片结果一致,分析其与患者临床病理特征的关系发现circ＿0007142的表达量与患者的淋巴结转移（P=0.037）及肿瘤的分化程度（P=0.008）有关;（2）在结直肠癌不同的细胞系中,circ＿0007142的表达水平在HT-29和HCT116细胞中显著高于正常结肠上皮细胞;（3）在HT-29和HCT116细胞中下调circ＿0007142的表达,可导致结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著下降;（4）通过qRT-PCR检测30对结直肠癌及对应的癌旁组织经过统计学分析发现miR-103a-2-5p在结直肠癌组织中低表达,其表达量与circ＿0007142成负相关,且在结直肠癌细胞系HT-29和HCT-116细胞上测干扰circ＿0007142前后miR-103a-2-5p的表达量,发现干扰后miR-103a-2-5p的表达量上调。荧光素酶报告基因实验也证实circ＿0007142和miR-103a-2-5p可以发生相互作用。结论:circ＿0007142在结直肠癌中高表达,其能够促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。circ＿0007142很可能通过miR-103a-2-5p发挥基因调节作用。
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