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目的: 观察低分子量肝素(LMWH)和地塞米松(DXM)对人白蛋白(ALB)致体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖及FN、TGF-β<,1>分泌的影响,初步探讨LMWH和DXM对肾间质纤维化的防治作用和机制。
方法: 本实验选择HK-2细胞为研究对象,分为正常对照组(单纯无血清1640组),白蛋白组(单纯无血清1640+不同浓度ALB 0.1-50g/l),LMWH I组(单纯无血清1640+ALB 5g/1+LMWH 25 IU/ml),LMWH II组(单纯无血清1640+ALB 5g/1+LMWH 250IU/ml),DXM I组(单纯无血清1640+ALB 5g/1+DXM 1x10<-2>g/l),DXM II组(单纯无血清1640+ALB 5g/1+DX M4x10<-2>g/l)。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法评估不同浓度的白蛋白对肾小管上皮细胞增殖的影响；使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清液中转化生长因子131(TGF-β<,1>)、纤维连接蛋白(FN)的分泌水平。
结果:
1. 人白蛋白对HK-2增殖的影响(MTT法):
1.1 不同浓度人白蛋白作用24小时对HK-2增殖的影响:结果显示如下:各白蛋白组的吸光度值分别为: ALB0.1g/1组为(0.837+0.074)、ALB0.5g/l组为(0.847±0.033)、ALB 1.0g/l组为(0.867+0.072)、ALB2.5g／l组为(0.879±0.064)、ALB5.0g／l组为(1.075±0.051)、ALB10g／l组为(1.006±0.01)、ALB20g／l组为(0.999±0.063)、ALB30g／l组为(0.899±0.059)、ALB50g／l组为(0.776±0.072)；ALB5.0、10、20g／l组与正常对照组(0.806±0.067)比较吸光度值均有明显升高(均为P<0.01)；余各浓度白蛋白组与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05)；ALB5.0g／l与ALB10、20g／l比较吸光度值均有明显升高(P<0.05，P<0.05)；HK-2增殖在ALB5.0g／l时最明显。
1.2 不同时间点人白蛋白对HK-2增殖的影响：5.0g／l结果显示如下：各时间点的吸光度值分别为：6h为(0.636±0.022)、12h为(0.746±0.022)、24h为(1.075±0.051)、48h为(0.557±0.017)，24h组与6、12、48h组比较吸光度值均有明显升高(P<0.01、P<0.01、P<0.01)，HK-2增殖在24h时最明显。
2. LMWH和DXM作用24小时对人白蛋白致HK-2增殖的影响(MTT法)：结果显示如下：各组吸光度值分别为：LMWH Ⅰ组为(0.923±0.047)、LMWH Ⅱ组为(0.829±0.038)、DXM Ⅰ组为(0.895±0.109)、DXMⅡ组为(0.878±0.036)，与ALB 5.0g／l(1.075±0.051)比较吸光度值均明显降低(均为P<0.01)；LMWHⅡ组与LMWHⅠ组比较吸光度值明显降低(P<0.01)；DXMⅡ组与DXM Ⅰ组比较无统计学意义(P>0.05)。
3. LMWH和DXM作用24小时对人白蛋白致HK-2分泌FN、TGF-β1的影响(ELISA法)：结果显示如下：ALB5.0g／l组与正常对照组比较，FN、TGF-β1分泌均明显升高(P<0.05、P<0.01)；LMWHII组与ALB 5.0gh组比较，FN和TGF一131的分泌明显降低(P<0.01，P<0.01)；DXMII组与ALB 5.0g／1组比较，TGF-β1分泌明显降低(P<0.01)，FN的分泌无统计学意义(P>0.05)。
结论：
1．人白蛋白具有促进HK-2增殖作用。
2．LMWH和DXM均可明显抑制人白蛋白诱导的HK-2增殖。
3．人白蛋白可促进HK-2分泌FN、TGF-β1。
4．LMWH可降低人白蛋白诱导HK-2的FN和TGF-β1的分泌；而DXM仅降低人白蛋白诱导HK-2的TGF-β1分泌。