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背景与目的嘌呤核苷酸在作为能量供应、代谢调节及组成辅酶等方面起着十分重要的作用,体内嘌呤核苷酸的合成代谢中,利用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等简单物质为原料,经过一系列酶促反应,合成嘌呤核苷酸称为从头合成途径。甘油酰胺核糖核苷酸甲酰转移酶(Glycinamide ribonucleotide formyltransferase,GART)已经确认为嘌呤从头合成中的关键酶,并介导肺癌、肝癌、胶质瘤等多种恶性肿瘤的细胞凋亡。本研究旨在探讨GART在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)发病中的作用及其机制,为寻找克罗恩病新的诊断及治疗方法提供理论基础。方法收集6例活动性CD患者和6例健康患者回盲部肠粘膜组织;建立2,4,6-三硝基苯磺酸(Trinitrobeezenesulphonic acid,TNBS)诱导的小鼠急性结肠炎模型,预期处死小鼠后取其结肠组织;体外培养人结肠癌HCT-116细胞和大鼠肠上皮IEC-6细胞;采用免疫印迹、PCR法测定组织和细胞中的GART表达水平,采用流式细胞学技术、Hoechst法、TUNEL法、Caspase-3活性检测、P53/PUMA水平测定法检测细胞内GART表达下调后对细胞凋亡的影响,及其对P38MAPK通路上下游相关分子的影响及机制,采用划痕试验检测GART表达下调后对细胞迁移的影响。结果CD患者和TNBS诱导的小鼠结肠炎组织中GART表达明显升高(P<0.01)。敲低GART表达能显著增加肠上皮细胞中促凋亡基因p53/PUMA的表达,以及P38的磷酸化水平(P<0.01),同时通过流式细胞学、Hoechst法、TUNEL法、Caspase-3活性检测的方法我们发现敲低GART表达后比对照组有更多的细胞凋亡(P<0.05)。在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激的肠上皮细胞中,GART表达水平呈时间和剂量依赖性,在20 ng/ml水平刺激24小时的时间点时达高峰。提前加入P38MAPK抑制剂SB230580再给予siGART转染的肠上皮细胞凋亡较单独给予siGART处理组明显减少(P<0.05)。siGART转染的肠上皮细胞中的MEKK3和MKK3蛋白水平表达均上调(P<0.05),siMEKK3转染的肠上皮细胞中的MKK3和p-p38蛋白水平表达明显下调(P<0.05)。结论GART在抑制肠上皮细胞凋亡和促进其迁移中起关键作用,从而维持肠上皮屏障的完整性,可能是克罗恩病新的治疗靶点。