舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对乳腺癌细胞增殖与转移能力的影响

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:happyfen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对乳腺癌细胞增殖与转移能力的影响及其作用机制。方法第一部分:(1)通过细胞培养记录并绘制BT474乳腺癌细胞的生长曲线。(2)CCK-8实验检测不同浓度帕瑞昔布钠(0μM,62.5μM,125μM,250μM,500μM,1000μM,2000μM,4000μM)对BT474乳腺癌细胞增殖能力的影响,并计算帕瑞昔布钠IC50值;同时检测不同时间段(12 h,24 h,48 h,72 h)帕瑞昔布钠、舒芬太尼及舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞增殖能力的影响,选择最佳实验剂量与处理时间用于后续细胞实验。(3)平板克隆形成实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞克隆形成能力的影响。(4)流式细胞周期实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞周期的影响。(5)Western Blot实验检测不同时间段(12 h,24 h,48 h,72 h)帕瑞昔布钠、舒芬太尼及舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌Cyclin D1蛋白表达的影响。第二部分:(1)基质黏附实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞黏附能力的影响。(2)划痕实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞迁移能力的影响。(3)transwell侵袭实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞侵袭能力的影响。(4)Western Blot实验检测舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞MMP-9、COX-2、VEGFA及EMT相关蛋白表达的影响。第三部分:(1)构建FVB/N小鼠乳腺癌原位移植模型,采用不同分组处理并记录小鼠生长情况,分析小鼠体重、肿瘤体积、荷瘤率以及生存曲线的改变,了解舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对乳腺癌小鼠肿瘤生长的影响。(2)通过HE染色、免疫组化染色、Western Blot实验,分析小鼠肺转移、乳腺癌组织血管生成以及乳腺癌组织MMP-9、COX-2、VEGFA、EMT相关蛋白的表达情况,了解舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对乳腺癌小鼠肿瘤转移的影响。结果第一部分:(1)根据细胞生长曲线可知细胞培养3~6天时,BT474乳腺癌细胞处于对数生长期,细胞呈岛叶状生长、贴壁良好。(2)CCK-8实验结果显示,帕瑞昔布钠可抑制BT474乳腺癌细胞的增殖并呈剂量依赖性(P<0.05),IC50值为299.5μmol/L;同时随处理时间的延长,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞的增殖抑制率呈明显上升改变,以处理24h最为显著(P<0.05)。(3)平板克隆形成实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可显著减少BT474乳腺癌细胞的克隆形成数(P<0.05)。(4)流式细胞周期实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠能够使BT474乳腺癌细胞阻滞于G1期,减少进入S期的比例,从而抑制细胞的增殖(P<0.05)。(5)Western Blot实验结果显示,随处理时间的延长,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞周期蛋白Cyclin D1表达呈逐渐下调改变,以处理24h最为显著(P<0.05)。第二部分:(1)基质黏附实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可使BT474乳腺癌细胞的黏附率下降(P<0.05)。(2)划痕实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可使BT474乳腺癌细胞的伤口愈合率减小(P<0.05)。(3)transwell侵袭实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可使BT474乳腺癌细胞的侵袭数减少(P<0.05)。(4)Western Bolt实验结果显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对BT474乳腺癌细胞MMP-9、COX-2、VEGFA蛋白的表达呈下调改变(P<0.05),同时还可上调上皮表型标志物E-cadherin蛋白表达(P<0.05),下调间质表型标志物N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达(P<0.05)。第三部分:(1)通过记录小鼠生长情况,显示舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对小鼠体重增长影响较小且还能增加小鼠荷瘤率,延长其生存时间。(2)HE染色实验与免疫组化染色实验显示,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠不仅减少乳腺癌小鼠肺转移结节数,而且还可降低乳腺癌组织内的血管生成(P<0.05)。Western Blot实验结果得出,舒芬太尼复合帕瑞昔布钠对小鼠乳腺癌组织MMP-9、COX-2、VEGFA蛋白表达呈下调改变(P<0.05),同时还可上调E-cadherin蛋白表达(P<0.05),下调N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达(P<0.05)。结论1.舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可抑制BT474乳腺癌细胞增殖与转移。2.舒芬太尼复合帕瑞昔布钠可抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长与转移。3.舒芬太尼复合帕瑞昔布钠抑制乳腺癌细胞增殖与转移可能与抑制EMT转变有关。
其他文献
目的回顾性分析膀胱癌患者行腹腔镜膀胱癌根治术后发生血液高凝状态的相关危险因素,并构建其危险因素预测模型予以评价,为临床采取预防血液高凝状态相关措施提供理论依据。方法回顾性收集2012年1月-2021年9月期间就诊于宁夏医科大学总医院泌尿外科337例行膀胱根治性切除病人的临床资料,经纳入排除标准筛选出符合条件的研究对象105例。依据术后凝血相关指标是否异常将患者分为两组:高凝组和非高凝组。对两组患者
学位
目的本实验以肾近曲小管上皮细胞(Renal proximal tubular epithelial cells,HK-2)为研究对象,探讨HK-2细胞暴露于一水草酸钙(Calcium oxalate monohydrate,COM)后,整合素连接激酶(Integrin linked kinase,ILK)在HK-2细胞表达水平的变化以及与上皮间质转换(Epithelial?mesenchymal
学位
目的通过对154例晚期上皮性卵巢癌(Advanced epithelial ovarian cancer,AEOC)患者的临床资料进行回顾性分析,探讨影响AEOC患者初次肿瘤细胞减灭术(Primary debulking surgery,PDS)满意程度的相关因素。方法选取2016年1月至2021年12月于宁夏医科大学总医院经过PDS的AEOC患者154例,其中满意组106例,不满意组48例。收集
学位
深渊海沟是水深超过6000米的海域,是海洋的最深处,因其独特的生态环境和生物地球化学过程,被认为是地球上最不被人了解的生态环境之一。近年来,深渊海沟逐渐成为海洋科学界研究的热点话题,研究人员通过对深渊海洋生物、海洋化学、海洋地质等方面的研究,发现有机质的输入、含量和活性对于维持深渊生态系统和深渊生物地球化学循环起着重要作用。阿塔卡马海沟位于东太平洋最南端,属于秘鲁-智利海沟深渊系统。阿塔卡马海沟所
学位
目的研究胎盘间充质干细胞(placental mesenchymal stem cells,PMSCs)对4-乙稀基环己稀二环氧(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)诱导卵巢功能不全大鼠(premature ovarian insufficiency,POI)卵巢功能的保护作用,探讨其激活m TORC1通路的可能作用机理,为临床治疗卵巢功能不全提供一个新的思路。方法分
学位
目的:分析高尿酸血症合并超重/肥胖的危险因素及中医证候分布特点,为临床干预治疗高尿酸血症合并超重/肥胖提供参考依据。方法:本研究收集2019年12月至2020年12月期间于银川市中医医院门诊和住院部、体检中心及碧水蓝天社区卫生服务中心就诊的高尿酸血症患者,共200例,根据体重指数将纳入的病例分为正常体重组和超重/肥胖组,比较两组在一般资料、烟酒嗜好、饮食习惯、身体测量指标、实验室指标、合并疾病等方
学位
目的胶质瘤是最常见、最致命的脑部肿瘤之一,因较高发病率、侵袭性、致死率、复发率被科学界广泛关注。因胶质瘤的增殖不受免疫系统的调控且呈现浸润性生长,这就使胶质的手术治疗难度高、易复发、存活率低,胶质瘤患者的平均生存期约为14.5个月。这些因素使胶质瘤患者的预后极其不理想。近几十年以来,随着医疗技术的迅速的发展,胶质瘤的治疗方式并没有发生根本性的改变,其主要的治疗方式仍然是以手术后辅助放化疗为主。但显
学位
目的探究卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)通过Hippo信号通路对大鼠卵巢发育和颗粒细胞(Granulosa cells GCs)雌激素分泌的影响。方法实验分为三部分,第一部分探索卵泡发育与Hippo信号通路的关系。2,3,6和8周(w)大鼠卵巢HE染色观察卵泡形态,计算原始和生长卵泡数量,免疫组化、Western blot检测Hippo信号通路因子LA
学位
研究目的:观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)患者体内中性粒细胞/淋巴细胞比值(Neutrophil/lymphocyte,NLR)、血小板/淋巴细胞比值(Platelet/lymphocyte,PLR)、超敏C反应蛋白(Hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)
学位
目的通过研究2009-2019年十年间医改项目“创新支付制度,提高卫生效益”的实施及政策不断调整时期中老年人住院费用的动态变化,分析医保相关政策的调整对中老年人住院受益程度公平性改善的贡献程度,评价医改实施效果,为宁夏医保政策的进一步完善和巩固提供基础数据的支持。方法利用十年间医保政策不断调整时期的四次调查数据,分析中老年人住院费用的动态变化,并采用广义线性模型探索中老年人住院自付费用及住院补偿费
学位