目的：以中药药代动力学方法对通脉丸方中有效组分配伍后的减毒情况进行研究,为临床合理用药提供依据,也为通脉丸最终开发为安全有效的组分中药奠定良好的基础。 　　方法：1、大鼠血浆样品中士的宁检测方法的建立。色谱条件为：Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1×50mm,1.7μm)；流动相：乙腈-酸水(23：77),酸水：0.02mol·L-1磷酸二氢钾与0.01mol·L-1庚烷磺酸钠等量混合,并用10%磷酸调体系pH为2.5；流速0.18mL·min-1；检测波长260nm；柱温30℃；进样量1μL。将含药的大鼠血浆在碱性条件下经甲基叔丁基醚二次萃取后进样分析。2、通脉丸方有效组分配伍浓缩液中士的宁的含量测定。对通脉丸方中各味中药进行分析,结合药效及毒性等特点将处方中各味中药分为八组,“两头尖、附子、马钱子”为一组,“黄芪、当归”为一组,“丹参、赤芍”为一组,蜂蜜、甘草、陈皮、琥珀和洋金花分别各为一组。按照正交设计表L8(27)将其中除去“两头尖、附子、马钱子”这一组之外的七组为七个因素,得到八种不同配比,将其分别与“两头尖、附子和马钱子”按照处方量配伍制备出八组药物,以方法1建立的超高效液相色谱法测定八组药物中士的宁的含量,以士的宁的含量为指标,各组分别与通脉丸原方组(第 1 组)进行比较,计算各组减毒率,得出最主要的影响因素。3、开展对通脉丸有效组分配伍浓缩液在大鼠体内毒代动力学的研究。正常大鼠每组5只,每只大鼠给予通脉丸有效组分配伍浓缩液28.8g·kg-1灌胃,分别于灌胃后2h、4h、6h、24h、28h、31h、48h、52h、55h取血,以方法1建立的超高效液相色谱法检测大鼠血浆中士的宁的浓度。所得的计量资料采用均数±标准差(x̅± s)表示,应用Winnonlin 5.2计算各组的毒代动力学参数,应用SPSS19.0进行t检验,与通脉丸原方组(第1组)比较,得到各个参数的P值,以AUC为研究对象,计算各组AUC减少率,得出各组的减毒作用强弱。 　　结果：1、在已建立的UPLC条件下,所测士的宁的峰形良好,无内源性物质干扰,线性关系良好,最低检测浓度为0.0432μg·mL-1,血浆的提取回收率较高,日内、日间RSD均小于10%,具有良好的稳定性。2、通脉丸方有效组分配伍浓缩液中士的宁的含量测定的结果如下：第 1 组：155.963μg·mL-1,第 2 组：136.064μg·mL-1,第 3 组：651.408μg·mL-1,第4组796.986μg·mL-1,第5组：104.748μg·mL-1,第6组：50.496μg·mL-1,第7组：912.607μg·mL-1,第8组：50.759μg·mL-1,计算各组的减毒率结果如下：第2组为：12.8%,第3组为：﹣318%,第4组为：﹣411%,第5组为：32.8%,第6组为：67.6%,第7组为：﹣485%,第8组为：67.5%。3、各组通脉丸方有效组分配伍浓缩液 的 主 要 代 谢 参 数 分 别 如 下 ： Cmax 分 别 为 (0.4868±0.0825)μg·mL-1 、(0.4039±0.1446)μg·mL-1 、 (0.4920±0.1520)μg·mL-1 、 (0.4256±0.1102)μg·mL-1 、(0.3154±0.0602)μg·mL-1 、 (0.1834±0.0506)μg·mL-1 、 (0.5158±0.2351)μg·mL-1 、(0.522±0.03665)μg·mL-1,Tmax分别为(26.4±2.19)h、(27.2±1.79)h、(28.0±0.0)h、(28.0±0.0)h、(26.4±2.19)h 、 (24.0±0.0)h 、 (26.4±21.9)h 、 (25.6±2.19)h , AUC ( 0-t ) 分 别 为(10.2719±3.2247)μg·mL-1·h、(8.8061±1.2458)μg·mL-1·h、(13.4966±4.5825)μg·mL-1·h、(11.0315±2.8732)μg·mL-1·h、(9.9291±1.4997)μg·mL-1·h、(5.0420±2.1712)μg·mL-1·h、(15.1362±6.3533)μg·mL-1·h 、 (5.7515±1.4928)μg·mL-1·h , AUC ( 0-∞ ) 分 别 为(10.7348±2.7305)μg·mL-1·h、(8.8741±1.2009)μg·mL-1·h、(13.5293±4.5873)μg·mL-1·h、(11.1190±2.8319)μg·mL-1·h、(10.0313±1.4517)μg·mL-1·h、(5.3662±2.0484)μg·mL-1·h、(15.1771±6.2968)μg·mL-1·h、(6.1433±1.2158)μg·mL-1·h,T1/2分别为(9.3308±4.6030)h、(11.0215±3.4593)h 、 (6.6564±1.9452)h 、 (14.7363±11.7127)h 、 (12.3706±7.1794)h 、(12.1122±7.9011)h 、 (6.3901±3.0695)h 、 (13.6511±2.701)h , CL 分 别 为(24.7691±5.7787)mL·h 、 (26.6705±3.0531)mL·h 、 (103.2669±48.1796)mL·h 、(122.7196±16.8454)mL·h 、 (17.2727±2.8873)mL·h 、 (15.8539±6.3360)mL·h 、(127.0582±54.3654)mL·h、(13.7174±2.7419)mL·h,VZ分别为(307.1407±117.5452)mL、(426.8874±142.0070)mL 、 (1014.1898±580.8306)mL 、 (2736.1288±2467.5314)mL 、(296.8160±135.2676)mL 、 (224.8514±73.4985)mL 、 (1359.4926±1135.4140)mL 、(273.4620±84.8497)mL。各组分别与通脉丸原方(第1组)参数进行比较,第2组Cmax (P<0.05)、AUC(0-t)(P<0.05)有显著性差异,第3组Tmax(P<0.05)、Vz(P<0.05)有显著性差异,第4组Tmax(P<0.05)有显著性差异,第5组AUC(0-t)(P<0.05)有显著性差异,第6组Tmax(P<0.05)有显著性差异,第7组Cmax(P<0.05)、Tmax(P<0.05)、T1/2(P<0.05)、CL(P<0.05)、Vz(P<0.05)有显著性差异,第8组AUC (0-t)(P<0.05)有显著性差异。各组分别与通脉丸原方(第1 组)的 AUC 进行比较,计算AUC减少率结果如下：第2组为：14.3%,第3组为：﹣31.4%,第4组为：﹣7.4%,第5组为：3.3%,第6组为：50.9%,第7组为：﹣47.4%,第8组为：44.0%。 　　结论：1、本课题对通脉丸方有效组分配伍浓缩液中士的宁的含量进行测定,对各组的测定结果进行统计分析,提示七个因素中“丹参、赤芍”是影响士的宁含量的最主要因素,“丹参、赤芍、琥珀、蜂蜜”减毒作用最强。2、本课题采用药动学软件对各组通脉丸方有效组分配伍浓缩液不同时间士的宁的血药浓度进行毒代动力学参数的估算,对参数进行统计分析,结果发现“丹参、赤芍、琥珀、蜂蜜”减毒作用最强。