目的：健脾补肾活血方(由黄芪、党参、白术、山药、山茱萸、女贞子、旱莲草、仙茅、仙灵脾、川芎、茯苓、红花、当归、菟丝子、陈皮、木香、泽泻组成)具有健脾补肾、活血化瘀的作用。导师张庚良教授经多年临床实践发现，应用健脾补肾活血法对糖尿病早期患者能够起到防治糖尿病肾脏病变的效果。本实验通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，给予药物干预，观察健脾补肾活血法对糖尿病大鼠血糖、血脂、肾功能、24h尿白蛋白排泄率、肾脏组织病理形态学变化及肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响，初步探讨本方保护肾组织的作用机制。方法：选用清洁级健康Wistar大鼠(雄性，体重约160~180g)46只，普通饲料适应性喂养1周后，正常对照组按体重随机选取10只形成，其余大鼠用于复制糖尿病模型。按55mg/kg体重计算，单次腹腔注射1%的链脲佐菌素枸橼酸缓冲液(枸橼酸缓冲液为0.1mmol/L，pH4.5)，正常对照组给予相当体积的1%柠檬酸缓冲溶液注射。72h后尾静脉采血，测定血糖数值≥16.7mmol/L，大鼠尿量及饮水量明显增多，即确定为糖尿病模型大鼠。将成模的大鼠随机分为模型对照组、健脾补肾活血方组(简称中药组)，厄贝沙坦组(简称西药组)，每组12只。造模成功后的第三天，各治疗组按成人剂量的10倍开始灌胃给药，每日一次。中药组给予健脾补肾活血中药每日11ml/kg体重(相当于3.5g/ml生药)灌胃，西药组给予厄贝沙坦溶液每日3.3ml/kg体重(相当于7.5mg/ml原药)灌胃，正常对照组与模型对照组均给予相应中药体积的生理盐水灌胃。连续灌胃8周。处死前一天，用代谢笼留取大鼠24h尿液，记尿总量，并测定24h尿白蛋白排泄率。于末次灌胃后禁食不禁水12h，称体重，2%戊巴比妥钠20mg/kg体重腹腔注射麻醉大鼠后股动脉取血，检测各组大鼠血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。处死动物，迅速取出右肾，去除包膜，滤纸吸干血迹后称取重量，记录肾重，计算肾重与体重的比值，即肥大指数。将部分肾脏组织石蜡包埋，常规组织切片，行光镜HE染色观察肾小球病理形态改变。无菌操作留取部分肾组织作为标本，4%多聚甲醛溶液中固定，免疫组化法测定纤溶酶原激活物抑制物-1的表达情况。结果：1一般情况观察一般情况包括大鼠的饮食量、饮水量、尿量、体重、精神状态、皮毛及活动状况。正常组大鼠饮食、饮水、尿量正常，体重增加明显，精神良好，皮毛有光泽，动作自如。模型组大鼠则多饮、多食、多尿，形体消瘦，精神萎靡，皮毛凌乱、枯黄，动作迟缓。有些大鼠随时间推移出现糖尿病各种并发症，如半身不遂、白内障、四肢水肿等。两个治疗组即中药组和西药组大鼠的一般情况与模型组相比较有一定程度的改善。模型组、中药组、西药组最终死亡大鼠数分别为1只、2只、1只，主要死因或为灌胃不当所致损伤，或为互相撕咬而致感染，或为偏瘫不能进食。2血糖的变化模型组、中药组及西药组大鼠血糖均明显高于正常组，有显著性差异(P＜0.01)；中药组有一定的降糖作用，与模型组之间比较血糖明显下降，且有显著性差异(P＜0.01)；而西药组降糖效果不显著，与模型组之间比较血糖下降不明显，无统计学意义(P＞0.05)。3血脂的变化模型组、中药组及西药组大鼠的TG和TC均明显升高，与正常组相比有显著性差异(P＜0.01)；中药组有一定的降血脂作用，与模型组比较血脂明显下降，有显著性差异(P＜0.01)；而西药组对血脂影响不大，与模型组比较无明显的差异(P＞0.05)。4肾功能的变化模型组、中药组及西药组的尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)与正常组相比明显升高(P＜0.01)；与模型组相比，两个治疗组均能降低BUN、Scr，差别有统计学意义(P＜0.01)；而中药组与西药组的肾功能指标无显著的差异(P＞0.05)。524h尿白蛋白排泄率的变化与正常组比较，模型组24h尿白蛋白排泄率明显升高(P＜0.01)，中药组24h尿白蛋白排泄率与模型组比较明显降低，有统计学意义(P＜0.01)，与西药组比较无统计学意义(P＞0.05)。6肥大指数(肾重/体重)比值的变化模型组的肾重/体重比值明显高于正常组(P＜0.01)。厄贝沙坦组与健脾补肾活血方组肾重/体重的比值明显低于模型组，与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。而中药组与西药组之间无显著性的差异(P＞0.05)。7对实验性糖尿病大鼠肾组织病理形态学的影响正常对照组肾小球结构完整，未见肾小球增大及细胞数增多，肾小球毛细血管基底膜、系膜、基质均未见明显异常。模型组可见肾小球明显增大，细胞核数目增加，肾小球毛细血管基底膜增厚，系膜细胞轻度增生，系膜区增宽，肾小管上皮细胞肿胀，部分肾小管出现细胞空泡变性。中药组及西药组大鼠肾组织病变与模型组比较有明显改善。8对实验性糖尿病大鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响与正常组比较，模型组及两个治疗组的大鼠肾脏中纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的表达明显高于正常组(P＜0.01)。经药物干预后，两个治疗组与模型组比较，PAI-1表达均明显减少(P＜0.01)，差别有统计学意义。中药组与西药组比较无显著差异(P＞0.05)。提示厄贝沙坦与健脾补肾活血方对糖尿病肾脏的保护作用，可能是通过下调PAI-1的表达来实现的。结论：1健脾补肾活血方可以明显改善糖尿病大鼠的一般状态，降低血糖、血脂、肌酐及尿素氮，减少尿蛋白，保护肾脏。2健脾补肾活血方与厄贝沙坦对糖尿病大鼠的影响有相同的部分，其中健脾补肾活血中药降糖降脂的作用优于厄贝沙坦。3健脾补肾活血方能抑制糖尿病大鼠肾脏PAI-1的表达，保护肾脏结构的完整和功能的稳定，为研究中药保护肾脏的机制提供了新的思路和途径。