硫化氢（H₂S）和多硫化氢（H₂Sn,n>1）在人体内普遍存在,均属于活性硫化物。H₂S是生理过程中重要的内源性信号分子之一,与许多生理功能有关而且也能引起一些疾病。H₂Sn是H₂S在细胞内氧化或酶催化产生的。在一些生理过程中H₂Sn与H₂S相比,H₂Sn有着更好的效果,因此H₂Sn被人们认为有着重要的生理作用。但目前人们对H₂Sn在生物体中的作用机理了解的较少。为了更好地研究H₂S和H₂Sn各自在生物体中的生理和病理作用,开发能快速有效地检测生物体内H₂S和H₂Sn的方法具有十分重要的意义。因此,本文基于H₂S和H₂Sn的性质构建了检测H₂S和分别检测H₂Sn和H₂S的探针分子。本文共分三章,具体内容如下:第一章绪论。主要介绍了含硫活性小分子中H₂S、H₂Sn的一些化学性质和生理功能,以及检测H₂S、H₂Sn含硫活性小分子荧光探针的研究进展。第二章以亚硝基为识别基团专一性检测H₂S探针的合成与应用研究。我们利用亚硝基与H₂S能快速反应生成氨基的原理,构建了一个以苯并吡喃嗡染料为荧光基团,亚硝基为识别基团的荧光探针4。由于亚硝基强的吸电子效应,探针4自身的荧光信号很弱。当与H₂S反应后,探针4中原来吸电子的亚硝基快速地转化为供电子的氨基,因此探针4在625 nm处的荧光强度增强。探针4能与Na HS在5 min左右快速地达到反应平衡。实验结果表明,检测体系的荧光信号与Na HS在0-4μM的浓度区间呈良好的线性关系（R2=0.993）。该方法的检出限为29 n M,具有高的灵敏度。同时该探针实现了人肝癌细胞SMMC-7721中内源与外源H₂S的荧光成像分析。第三章以氮丙啶羧酸甲酯为识别基团检测H₂Sn和H₂S的探针的构建与性质研究。我们构建了以氮丙啶羧酸甲酯为识别基团,NBD染料为母体的探针A1。基于该探针与H₂Sn和H₂S具有不同的反应途径实现二者的检测。探针A1自身在393 nm处有较强的吸收。当探针A1与H₂Sn反应时,H₂Sn能使探针A1中的氮丙啶开环,因此探针A1会在472 nm处出现一个新的吸收峰,此吸收峰随着H₂Sn的浓度增加而逐渐增强,同时探针A1自身在393 nm处的吸收强度逐渐变弱,这就形成了吸收强度比率型的变化。当探针A1与H₂S反应时,由于H₂S与NBD染料母体发生亲核取代反应生成了相应的巯基取代产物。此时探针A1会在536 nm处出现一个新的吸收峰,并随着H₂S的浓度的增加而逐渐增强,而在393 nm处的吸收强度逐渐降低。同样536 nm和393 nm处的吸收强度形成了比率型的变化。通过这两种不同的反应途径,反应体系生成了不同的物质,导致反应体系在吸收光谱上的最大吸收位置不同,从而实现了对H₂Sn和H₂S的检测。实验结果表明,探针A1能够快速地检测H₂Sn和H₂S,对H₂Sn和H₂S具有良好的选择性,且检测体系的吸收信号分别与Na2S2和Na2S在0-20μM和0-5μM范围内具有良好的线性关系。