BRD4抑制剂JQ1增加非小细胞肺癌放射敏感性的作用及机制研究

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目的:放射治疗是局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的重要治疗方式之一。然而,放疗抵抗为限制其疗效的重要原因。溴结构域蛋白4(Bromodomain-containing protein4,BRD4)是溴结构域和超末端结构家族(Bromodomain and extra-terminal,BET)的成员,其可以识别并结合乙酰化的组蛋白,通过招募不同的转录调节因子来调节靶基因表达。本研究探讨BRD4抑制剂JQ1对NSCLC放射敏感性的影响。  方法:为了研究JQ1对NSCLC的放射增敏作用,采用克隆形成实验和细胞活性测定(CCK-8)实验检测细胞放射敏感性的变化,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡水平,线粒体膜电位检测细胞线粒体功能,免疫荧光染色(γH2AX)检测DNA双链断裂和修复,免疫印迹试验(Western Blot)和聚合酶链式反应(PCR)检测细胞基因表达变化,构建p21敲低的稳定细胞株探索p21在JQ1的放射增敏中的作用,裸鼠移植瘤模型及移植瘤免疫组化实验验证JQ1在体内的放射增敏作用。  结果:克隆形成实验和CCK-8实验表明JQ1增加了NSCLC细胞的放射敏感性。JQ1(500nM)联合放射(4Gy)可以诱导NSCLC细胞G2/M期阻滞、提高细胞凋亡水平、降低线粒体膜电位和阻碍DNA双链断裂的修复。Western Blot、PCR及基因敲减实验显示p21在JQ1诱导的G2/M期阻滞、细胞凋亡及放射增敏作用中起重要作用。裸鼠移植瘤模型实验中也证明了JQ1对NSCLC具有放射增敏作用。  结论:B R D4抑制剂 J Q1可以增强NSCLC的放射敏感性、减少放射抗性。
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