聚乙二醇(PEG)修饰蛋白质技术已成功用于改善多种蛋白质药物的性能。为了解决眼镜蛇神经毒素(CNT)临床应用时起效慢、镇痛效果不太显著的问题，本课题将PEG修饰技术应用于CNT。 用简单的两步层析法——Source 30S阳离子交换和Superdex 75凝胶过滤，自眼镜蛇毒粗品中分离纯化出了CNT。SDS-PAGE检测其为单一条带，RP-HPLC检测纯度达100％。总的纯化收率为22.4％，比文献报道的12％得到了提高。 针对纯化的CNT，采用了四种活化mPEG试剂——mPEG-SPA、mPEG-SMB、mPEG-ButyrALD和mPEG2-NHS修饰氨基。以获得最高比例的单修饰产物为目标，优化修饰反应条件。最终确定mPEG-SPA 5K为最适宜的修饰剂；优选的反应条件是pH8.0，CNT／mPEG(摩尔比)为1∶5，反应时间1h，温度28℃，其中反应摩尔比的影响最显著，而pH的影响最微弱。修饰产物用Source 30S阳离子交换层析法分离纯化。 对修饰产物进行了分子量、稳定性、免疫原性及药效的测定，并对修饰位点做了初步研究。该产物经SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS法检测为单修饰。与天然CNT相比，其反复冻融稳定性和热稳定性得到提高；免疫原性和毒性大为降低；在同样剂量下和相同时间点的镇痛活性也得到增强。以上性质显示出了PEG修饰的优越性。