益气活血法对高血压小鼠心室重构的作用及机制研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:chaosmoon
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目的:利用血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)灌注方式制备高血压模型小鼠,探讨益气活血法的代表方-芪参益气方对高血压小鼠左室肥厚及心肌纤维化作用及机制。方法:采用皮下灌注AngⅡ的方式模拟高血压模型小鼠。将60只C57小鼠,随机分为:对照组、AngⅡ组(模型组)、芪参小剂量组、芪参大剂量组、卡托普利组。造模8周末开始给予药物干预。治疗8周后,测量小鼠尾动脉收缩压(SBP)、心脏重量指数、心脏超声。HE染色法观察心脏组织形态;Masson染色法、天狼猩红染色检测心肌纤维化;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);酶联免疫法检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫组化染色法分析NF-κB的表达。PCR方法检测ANP、BNP、β-MHC的表达。采用Western blotting方法检测小鼠心脏中TLR4、IκBα和p65蛋白表达水平。结果:1.AngⅡ组小鼠的平均收缩压均大于150mm Hg,高血压小鼠模型成功建立。与模型组比较,药物干预组的LVEDd、LVESd降低,LVEF、LVFS升高,说明芪参益气方、卡托普利均能有效改善心功能,减少左室扩张。芪参高剂量组疗效最明显。2.与模型组比较,药物干预组的心脏重量指数降低明显,心肌肥厚基因ANP、BNP、β-MHC指标有效改善,说明芪参益气方和卡托普利能缓解心肌肥厚,芪参高剂量组效果最明显。3.HE染色模型组心肌细胞横径增大,药物干预组的心肌纤维紊乱减轻,芪参高剂量组效果最明显。Masson染色观察到模型组大量胶原纤维,呈间质纤维化和血管周围纤维化现象。药物干预组可抑制心肌胶原排列紊乱,抑制心肌纤维化,芪参高剂量组和卡托普利组效果明显。4.与模型组比较,药物干预组的炎症因子IL-lβ、IL-6、TNF-α表达均下调,芪参高剂量组效果最优。5.与模型组相比,药物干预组均能提高血清中抗氧化酶SOD活性,降低丙二醛MDA含量,芪参高剂量组效果最明显。6.观察NF-κB免疫组化分析:模型组散在较多棕黄色颗粒状物,分布广泛,药物干预组仅见少量棕黄色颗粒,以芪参高剂量组效果最明显。7.Western blot分析:芪参益气方及卡托普利组TLR4、p65蛋白水平表达水平明显降低,IκBα蛋白水平显著升高。表明芪参益气方和卡托普利通过抑制NF-κB p65信号通路的激活,发挥了抑制心肌肥厚的作用,芪参大剂量组与卡托普利组TLR4、p65蛋白表达无显著差异。结论:1.AngⅡ可以成功诱导小鼠高血压心肌肥厚模型。2.芪参益气方能够改善和抑制小鼠心肌肥厚和心肌纤维化且作用与卡托普利相当。3.芪参益气方抑制高血压小鼠心肌肥厚和心肌纤维化,可能与其能够阻断TLR4/NF-κB信号通路有关。
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