【摘 要】
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目的: 研究自体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)复合胶原膜(medical collagen membrane of gtr,MCMG)对兔膝关节局部全层软骨缺损的修复作用。方法: 1 .抽取
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目的: 研究自体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)复合胶原膜(medical collagen membrane of gtr,MCMG)对兔膝关节局部全层软骨缺损的修复作用。方法: 1 .抽取新西兰大白兔髂棘骨髓,梯度密度离心法分离结合贴壁筛选法获得MSCs,应用流式细胞术鉴定,并观测在体外培养条件下MSCs的形态、生长特点。取第三代MSCs,Hoechst-33342荧光标记后种植于胶原膜支架上,培养48小时后,移植于兔膝关节双侧股骨内髁负重区、股骨滑车软骨缺损处。2 .选用健康的新西兰大白兔27只,随机分成A , B , C 3 个处理组各9 只,A 处理组(MSCs/ MCMG) 双侧股骨内髁负重区、股骨滑车软骨缺损处植入MCMG与自体MSCs复合物;B处理组(MCMG) 单纯植入MCMG;C 处理组(对照) 不作任何植入。分别于术后4 , 8 和12周各处死3只动物,取材进行大体、组织学及免疫组化染色观察,根据关节软骨组织学计分标准进行评分,数据输入SPSS 11. 0 软件统计分析,比较各组的评分差异是否具有统计学意义。3 .荧光显微镜观察修复组织的细胞来源。结果:1 .采用梯度密度离心法分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的MSCs,并能大量增殖;2 .MSCs复合MCMG组为透明软骨样修复,而单纯MCMG移植组和对照组为纤维性修复。对术后12周大体及各阶段组织学形态评分结果示:MSCs复合MCMG在股骨内髁与在滑车修复无明显差别( P> 0. 05);MSCs/ MCMG 组明显优于MCMG植入组和对照组( P < 0. 05) ; MCMG植入组优于对照组( P < 0.05) 。3 .修复组织的细胞来源于移植的MSCs。结论:1.自体MSCs复合胶原膜对兔膝关节全层软骨缺损有修复作用。2 .修复组织的细胞来源于移植的MSCs。
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