TAT-SOD的性质表征及其辅助降血糖效果的研究

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糖尿病及其并发症严重影响着人们的健康,氧化应激被认为是糖尿病及其并发症发病机理的共同途径。超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是机体中最重要的抗氧化酶,可期在糖尿病治疗中发挥着重要的作用。但由于SOD是大分子蛋白质,细胞膜通透性差,只能清除胞外的自由基,这限制了SOD在临床上的使用。TAT-SOD是TAT蛋白转导结构域与SOD的融合蛋白,可望改善以上问题,所以本文在实验分析TAT-SOD理化特性的基础上,对比研究了TAT-SOD与天然SOD的辅助降血糖效果。本实验通过测定TAT-SOD对不同温度、pH以及对胃蛋白酶的稳定性,来研究TAT-SOD的理化性质。然后对比分析相同剂量的天然牛血SOD和TAT-SOD、不同剂量的TAT-SOD以及TAT-SOD的灌胃和灌嘴不同给药方式,分别对Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病模型大鼠的体重、血糖、口服糖耐量(OGTT)、组织(包括心、肝、肾、胰腺、脾、骨骼肌)SOD、血浆胰岛素(INS)、胰高血糖素(GLUCA)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、丙二醛(MDA)、糖化白蛋白(GA)和血脂水平的影响。研究结果表明,SOD和TAT-SOD对Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病模型大鼠均有着显著的辅助降血糖效果,TAT-S OD(中)剂量组最好。对Ⅰ型糖尿病治疗结果发现,TAT-SOD控制体重和血糖效果明显好于SOD(P<0.05);而在OGTT试验中,二者效果相当;TAT-SOD组与SOD组的肝脏SOD酶活水平相当,但肾脏SOD酶活水平前者明显高于后者;血浆生化水平,SOD和TAT-SOD都可以提高INS和AMPK水平,降低MDA水平TAT-SOD好于SOD。对Ⅱ型糖尿病治疗结果发现,在体重控制上TAT-SOD与SOD相当;但是血糖控制、OGTT上TAT-SOD好于SOD(P<0.05),且TAT-SOD显著降低了GA水平(P<0.05);SOD和TAT-SOD都可以降低MDA和GLUCA,改善INS方面TAT-SOD好于SOD;在血脂控制水平方面,TAT-SOD不但显著提高高密度脂蛋白水平(P<0.05),而且降低总胆固醇和甘油三酯水平含量(P<0.05)。灌胃效果与灌嘴相当,说明在不同给药方式下,TAT-SOD都可以起到辅助降低血糖疗效。这些结果说明SOD和TAT-SOD都具有明显辅助降血糖效果,且TAT-SOD的总体效果好于SOD。这些效果可能是基于TAT-SOD与SOD对消化道的抗氧化作用,TAT蛋白转导结构域进一步提高了SOD的这种抗氧化作用。
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