外泌体miRNA在急性冠脉综合征患者外周血浆中水平变化的研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaiserking
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背景:急性冠脉综合征(Acute coronary syndrome,ACS)是一种心脏急性缺血综合征,其中包括急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)和不稳定型心绞痛(Unstable angina pectoris,UA)。ACS是严重危害人类健康、增加家庭和社会负担的急危重症之一,所以寻找具有高灵敏性和高特异性的诊断生物标志物对ACS患者意义重大。外泌体是一类重要的携带mi RNA、m RNA和蛋白质等物质的细胞外囊泡,其作为细胞间通讯的重要媒介可将其内容物传递给靶细胞从而调节靶细胞的活动。外泌体的组成成分取决于其来源细胞的类型、疾病状态或形成过程中的刺激,缺血缺氧等病理生理过程不仅参与调控了外泌体的分泌与功能,还可以选择性地改变外泌体mi RNAs的种类与含量。研究发现,外泌体mi R-183可作为预测AMI的生物标志物,但目前外泌体mi RNAs在ACS中的研究极少。细胞凋亡、坏死,炎症反应及斑块稳定性的调节等过程均不同程度地参与了ACS的发生发展。研究发现,mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a与上述病理生理过程相关,且循环中的mi R-378和mi R-145对ACS具有诊断价值,mi R-320、mi R-125b和mi R-23a对心肌梗死具有诊断价值,与循环中的mi RNAs相比,外泌体中的mi RNAs在磷脂双分子层膜的保护下可避免被循环RNA酶降解而更加稳定。综上,外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a在ACS患者血浆中的表达水平变化及其临床意义值得进一步去探索。目的:本研究分析了5种外泌体mi RNAs(mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b、mi R-23a)在ACS患者血浆中的表达水平变化,并探讨上述5种血浆外泌体mi RNAs是否对ACS的发生有一定的预测价值,最后讨论它们在ACS发生发展过程中可能参与的机制。方法:选取2020年7月至2020年12月于我院明确诊断为ACS的患者62例(AMI组受试者34例,UA组受试者28例),以及对照组受试者31例,为同时期经造影检查显示冠状动脉无明显狭窄的患者。采集受试者外周静脉血,离心后获取血浆,应用exo RNeasy kit提取受试者血浆外泌体中的总RNA,通过实时聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测ACS组和对照组受试者血浆外泌体中mi RNAs(mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b、mi R-23a)的表达水平并进行统计学分析。建立受试者工作特征曲线(ROC)以评估血浆外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a对ACS发生的预测能力。ROC曲线下面积(AUC)用于评估所选变量的最佳临界值和预测能力。结果:1.对ACS组及对照组患者血浆外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a的表达水平进行统计学分析,结果显示:ACS组患者血浆外泌体中mi R-378的表达水平较对照组上调(1.503(1.236,1.787)比1.041(0.718,1.246),p<0.0001);ACS组患者血浆外泌体中mi R-145的表达水平较对照组上调(1.920(1.312,2.864)比1.122(0.307,1.420),p<0.0001);ACS组患者血浆外泌体中mi R-320的表达水平较对照组下调(0.564(0.384,0.666)比0.894(0.795,1.180),p<0.0001);ACS组患者血浆外泌体中mi R-125b的表达水平较对照组下调(0.275(0.162,0.432)比0.720(0.658,1.019),p<0.0001);ACS组患者血浆外泌体中mi R-23a的表达水平较对照组下调(0.270(0.141,0.481)比0.829(0.684,1.069),p<0.0001)。2.对ACS组进行亚组分析,将AMI组、UA组及对照组患者的血浆外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a的表达水平进行统计学分析。结果显示:AMI组患者血浆外泌体中mi R-378和mi R-145的表达水平均较对照组上调(p<0.0001);AMI组患者血浆外泌体中mi R-320、mi R-125b和mi R-23a的表达水平均较对照组下调(p<0.0001);UA组患者血浆外泌体中mi R-378、mi R-145的表达水平均较对照组上调(p<0.001);UA组患者血浆外泌体中mi R-320、mi R-125b和mi R-23a的表达水平均较对照组下调(p<0.0001);AMI组患者血浆外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a的表达水平与UA组相比无明显统计学差异(p>0.05)。3.为评估血浆外泌体中mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b和mi R-23a对ACS发生的预测能力,对其进行ROC分析。结果显示:mi R-378的AUC为0.812(95%CI:0.721-0.903;p<0.0001),最佳临界值为1.242,敏感性为79.0%,特异性为72.4%;mi R-145的AUC为0.817(95%CI:0.730-0.903;p<0.0001),最佳临界值为1.604,敏感性为66.1%,特异性为83.9%。1/mi R-320的AUC为0.939(95%CI:0.893-0.986;p<0.0001),最佳临界值为1.332,敏感性为91.9%,特异性为83.9%;1/mi R-125b的AUC为0.910(95%CI:0.836-0.984;p<0.0001),最佳临界值为1.581,敏感性为93.5%,特异性为80.6%;1/mi R-23a的AUC为0.891(95%CI:0.826-0.956;p<0.0001),最佳临界值为1.782,敏感性为80.6%,特异性为90.3%。结论:ACS患者血浆外泌体中的mi R-378、mi R-145表达水平上调,mi R-320、mi R-125b、mi R-23a表达水平下调;ROC曲线分析结果提示血浆外泌体中的mi R-378、mi R-145、mi R-320、mi R-125b、mi R-23a可作为辅助诊断ACS的生物标志物。
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