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囊型包虫病是由细粒棘球绦虫的续绦期幼虫寄生在宿主的肝、肺等脏器引起的一种严重危害健康的人畜共患寄生虫病,该病严重影响了我国乃至全世界人类的健康以及畜牧业的发展。囊型包虫病的防治主要是依靠分子疫苗,Eg95基因被公认的目前细粒棘球绦虫所有抗原基因中最有前途的疫苗候选基因。Eg95疫苗通过在六钩蚴表面表达的抗原与抗体和补体一起介导包囊发生溶解而产生保护作用,对囊型包虫病的防治意义重大。由于来自不同地域、不同宿主的Eg存在着差异,出于Eg95疫苗的安全性和有效性的考虑,更为安全和有效的Eg95新疫苗的研发具有十分重要的意义。本文利用PCR的方法,扩增得到细粒棘球绦虫青海株Eg95的全长基因,测序表明该基因序列全长为1262bp,由3个外显子,2个内含子组成,3个外显子长度分别为70bp、306bp和95bp。Eg95基因开放阅读框全长为471bp,编码156个氨基酸。我们测定的Eg95基因序列与以前报道的青海株、澳大利亚株和美国株的Eg95基因序列比较表明,总共只有41个碱基存在差异,其中36处发生在内含子部分,只有5处是发生在外显子部分。在氨基酸水平上,它们之间只有2个氨基酸的差异。利用原核表达载体pGEX-5X-1,构建了含Eg95基因的重组表达质粒pGEX-5X-1/eg95。酶切鉴定后,转化大肠杆菌表达菌株BL21中,37℃、0.8mMIPTG条件下诱导表达。SDS-PAGE电泳显示在40KD处有一特异性的条带,质谱鉴定和酶联免疫吸附鉴定(ELISA)表明在大肠杆菌中成功的表达了GST-eg95的融合蛋白。用表达的融合蛋白免疫家兔,获得了兔抗eg95抗体。ELISA表明该抗体的有效效价约为1:1600,为以后进一步大规模制备eg95抗体建立了基础。