目的 铁是各种生命细胞增殖和功能活动必需的重要元素之一。已有研究发现铁与肿瘤的发生、发展关系密切。富铁可通过一定的机制抑制凋亡、促进肿瘤细胞的生长,铁剥夺则可通过抑制DNA的合成和诱导细胞凋亡而抑制肿瘤细胞的生长。 近来研究发现线粒体凋亡途径是细胞凋亡的主要通路。细胞凋亡时,线粒体膜电位(△Ψm)下降甚至消失,释放细胞色素C(Cyt c)、凋亡因子Smac/Diable、凋亡诱导因子(AIF)等线粒体促凋亡蛋白,激活Caspase酶的级联反应,裂解细胞结构蛋白和核DNA,执行凋亡。目前,有关铁对白血病细胞凋亡线粒体途径影响的研究报道较少见。 本实验以人白血病细胞株HL-60细胞为研究对象,通过观察去铁胺及三氯化铁对HL-60细胞凋亡时△Ψm、Caspase3等线粒体途径相关指标的影响,探讨铁对白血病细胞凋亡线粒体途径的影响及其机制,为临床治疗白血病及其它肿瘤提供理论和实验室依据。 方法 在HL-60细胞培养基中分别加入不同浓度的去铁胺(10、50、100、500μmol/L)或三氯化铁(10、100μmol/L),造成细胞内铁剥夺和富铁状态,MTT法检测不同铁状态下细胞活力的变化;相差显微镜观察凋亡细胞的形态学改变,TUNEL法和流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;罗丹名-123(Rh-123)染色后,采用流式细胞仪(FCM)检测线粒体膜电位的变化;免疫组化法检测Caspase 3表达和活性;原位杂交法检测凋亡基因bax的转录水平。