目的:通过体内建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)实体瘤模型及体外培养LLC细胞,研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)诱导LLC细胞凋亡和自噬的作用及其分子机制。方法:采用C57BL/6J小鼠建立LLC实体瘤模型。将荷瘤小鼠随机分为5组,另设不接种肿瘤细胞的正常对照组,每组10只。接种瘤细胞24 h后各组小鼠分别给药。GBEE 3个组(50、100、200mg/kg体重)灌胃(i.g.)给药,阳性对照组腹腔注射(i.p.)环磷酰胺(20mg/kg体重),模型对照组和正常对照组灌胃(i.g.)给予生理盐水(NS)。0.1mL/10g体重,每天1次,连续18 d。停止给药的次日,剥离小鼠的移植瘤并称取瘤质量和计算抑瘤率。体外实验,采用MTT法检测GBEE对LLC细胞及原代培养的小鼠肺细胞增殖的影响。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用Rhodamine 123法检测线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,MTP);采用 MDC(Dansylcadaverine)染色法观察细胞中嗜酸性液泡的形成;使用透射电镜确认自噬体的形成;采用qRT-PCR法检测细胞Beclinl及Atg5 mRNA的表达;采用Western blot方法检测细胞相应部位的Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3、Fas、FasL、Beclin1、Atg5、LC3 Ⅰ/Ⅱ、MAPK 信号通路蛋白、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-p70S6k 及 p70S6K 蛋白的表达。结果:GBEE可抑制小鼠LLC移植瘤生长,在50-200mg/kg剂量下其抑制率具有量效关系。GBEE(5-160μg/mL)体外可抑制 LLC 细胞增殖,IC50 为 162.43 μg/mL。在 5-160μg/mL浓度下GBEE对原代培养的小鼠肺细胞无明显抑制作用。GBEE(10,20和40μg/mL)作用后LLC细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,Bax/Bcl-2比值升高,同时其也促进线粒体膜上的Bax/Bcl-2易位以及Cyt C从线粒体释放到胞浆;此外,GBEE使LLC细胞cleaved-Caspase-3蛋白表达上调,Fas及其配体FasL的蛋白表达水平皆提高。另外,GBEE(10,20和40μG/mL)可促进LLC细胞中嗜酸性液泡的产生与活化,并使细胞中自噬体产生增多。同时,GBEE显著上调Beclin1和Atg5 mRNA及其蛋白表达,并下调LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白比值。结果还显示,在10,20和40μg/mL浓度下,GBEE使LLC细胞p-p38和p-AMPK蛋白表达水平上调,p-ERK1/2、p-JNK1/2、p-mTOR及p-p70S6K 蛋白的表达水平显著下调,而 ERK1/2、JNK1/2、p38、AMPK、mTOR 及 p70S6K的表达无明显变化。结论:GBEE对Lewis肺癌的抗肿瘤作用与其诱导LLC细胞凋亡和自噬有关。该效应涉及对LLC细胞MAPK信号通路与AMPK/mTOR/p70S6k信号通路的调控。