中空纤维膜微萃取—超高效液相色谱检测生化小分子的研究

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第一章绪论近年来,超高效液相色谱(UHPLC)技术快速发展的一个新兴的领域,并广泛的应用于多种物质的检测分析。本章简要的对超高效液相色谱的原理、系统、特点和与其联用的检测器,以及液相微萃取技术的原理、应用和与其联用的检测手段进行介绍。本论文是基于三相中空纤维膜液相微萃取技术对实际样中的分析物质进行净化、富集,再结合使用超高效液相色谱-二极管阵列检测(UHPLC–DAD)分析系统对此检测分析。本章的最后也会对论文的研究的目的和意义进行简要的介绍。第二章中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱法检测鸡肉中六种磺胺类抗生素的研究本章探究了三相(液-液-液)中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱(HF-LPME-UHPLC)方法,用于检测鸡肉中六种磺胺类药物的残留。设计了三相(液-液-液)中空纤维膜微萃取系统,优化HF-LPME最佳萃取条件:以正辛醇为萃取剂,接收相样品中NaOH的浓度为0.2 mol/L,给出相样品溶液中盐酸浓度为1.0 mmol/L,Na2SO4浓度为375 g/L,萃取温度为30℃,搅拌速度为300 r/min,萃取时间为4h。六种磺胺类药物经萃取后进行色谱分析,在6 min内达到了基线分离,线性关系良好,R2均大于0.9989,富集倍数为188950倍,检出限为0.030.1 ng/mL(S/N=3)。加标浓度为50μg/kg的鸡肉组织样品的加标回收率为86.3%95.6%,相对标准偏差为3.13%4.33%(n=5)。表明了该方法的灵敏度高、重复性好,可用于鸡肉中磺胺类抗生素的检测。第三章中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱法检测大肠杆菌中氨基酸的研究本章探究了三相(液-液-液)中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱(HF-LPME-UHPLC)法测定大肠杆菌中八种氨基酸。设计了三相中空纤维膜微萃取系统,优化了HF-LPME最佳萃取条件:萃取剂为正辛醇,接收相NaOH的浓度为0.3mol/L,给出相样品溶液中盐酸浓度为5.0 mmol/L,NaCl浓度为200 g/L,萃取温度为25℃,搅拌速度为500 r/min,萃取时间为4 h。经过衍生并萃取后,八种氨基酸的色谱分析,在5 min内达到了基线分离,线性关系良好,R2均在0.999以上,富集倍数为110290倍,检出限为0.080.35μmol/L(S/N=3)。大肠杆菌样品中加入10μmol/L氨基酸的加标回收率为89.61%102.74%,相对标准偏差为3.15%4.28%(n=5)。本方法灵敏度高、重复性好,可用于细菌中氨基酸的检测。第四章中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱法检测大肠杆菌发酵产生的短链脂肪酸的研究本章探究了三相(液-液-液)中空纤维膜微萃取-超高效液相色谱(HF-LPME-UHPLC)方法为测定由大肠杆菌发酵产生的六种短链脂肪酸。设计了三相中空纤维膜微萃取系统,优化得到HF-LPME的最优的萃取条件为:以正辛醇作萃取剂,接收相样品溶液中NaOH的浓度为1.0×10-44 mol/L,给出相样品溶液中盐酸浓度为0.06 mmol/L,萃取温度为25℃,搅拌速度为400 r/min,萃取时间为60min。六种短链脂肪酸经萃取后进行色谱分析,在6 min内达到了基线分离,线性关系良好,R2均大于0.999,富集倍数为95146倍,检出限为0.261.33μmol/L(S/N=3)。加标浓度为10μmol/L的大肠杆菌发酵液样品中的加标回收率为86.07%95.51%,相对标准偏差为3.01%4.29%(n=5)。实验结果表明了本方法灵敏度高、重复性好,可用于大肠杆菌发酵产生的短链脂肪酸的检测。
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