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目的：
1、探寻青蒿琥酯对猪肾上皮细胞(LLC-PK1)的活性作用。
2、探究不同剂量的青蒿琥酯对LLC-PK1细胞在蛋白水平上的作用，对差异表达蛋白的定性与定量测定。
3、探讨青蒿琥酯对LLC-PK1细胞作用的潜在机制。
4、探析小分子酪氨酸激酶的抗体识别反应。
方法：
1、通过MTT比色法确定青蒿琥酯对LLC-PK1细胞的抑制率为50％时的药物浓度(IC50)以及抑制率为10％时的药物浓度(IC10)。
2、采用对LLC-PK1细胞提取、反相液相分离以及等量异位标签(iTRAQ)技术，鉴定青蒿琥酯对LLC-PK1作用后表达的差异蛋白。
3、通过生物信息学技术分析差异表达蛋白，在基因功能注释(GO)、KEGG通路分析(KEGG PATHWAY)、PPI(蛋白质-蛋白质互作网络)等方面，探讨青蒿琥酯对LLC-PK1细胞作用的潜在机制。
4、运用酶联免疫技术，制备小分子酪氨酸激酶抑制剂的多克隆抗体。基于交叉识别反应，初步分析小分子酪氨酸激酶的交叉识别反应抗体识别技术。
结果：
1、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞表现出一定抑制作用，IC50为20uM IC101.8uM。
2、青蒿琥酯作用LLC-PK1细胞后，共得到3375个蛋白质。差异表达蛋白质数量，IC50VS正常组(NC)，IC50VS NC，IC50VS IC10分别是451、470、150个。
3、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞三组在GO、KEGG PATHWAY、PPI均存在一定影响。
4、伊马替尼及尼罗替尼多克隆抗体特异性较差，拉帕替尼多克隆抗体特异性较好并建立成功标准曲线。
结论：
1、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要表现在干扰氮类化合物的生物合成过程;影响各细胞组分，如细胞器、囊泡、线粒体;干扰各种分子结合功能。
2、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要影响了是代谢、核糖体和氧化磷酸化通路。
3、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要的节点蛋白数量IC50VS NC，IC50VS NC，IC50VS IC10分别是38、40、40个。
4、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞的潜在机制可能是产生氧化胁迫，影响细胞损伤或坏死。
1、探寻青蒿琥酯对猪肾上皮细胞(LLC-PK1)的活性作用。
2、探究不同剂量的青蒿琥酯对LLC-PK1细胞在蛋白水平上的作用，对差异表达蛋白的定性与定量测定。
3、探讨青蒿琥酯对LLC-PK1细胞作用的潜在机制。
4、探析小分子酪氨酸激酶的抗体识别反应。
方法：
1、通过MTT比色法确定青蒿琥酯对LLC-PK1细胞的抑制率为50％时的药物浓度(IC50)以及抑制率为10％时的药物浓度(IC10)。
2、采用对LLC-PK1细胞提取、反相液相分离以及等量异位标签(iTRAQ)技术，鉴定青蒿琥酯对LLC-PK1作用后表达的差异蛋白。
3、通过生物信息学技术分析差异表达蛋白，在基因功能注释(GO)、KEGG通路分析(KEGG PATHWAY)、PPI(蛋白质-蛋白质互作网络)等方面，探讨青蒿琥酯对LLC-PK1细胞作用的潜在机制。
4、运用酶联免疫技术，制备小分子酪氨酸激酶抑制剂的多克隆抗体。基于交叉识别反应，初步分析小分子酪氨酸激酶的交叉识别反应抗体识别技术。
结果：
1、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞表现出一定抑制作用，IC50为20uM IC101.8uM。
2、青蒿琥酯作用LLC-PK1细胞后，共得到3375个蛋白质。差异表达蛋白质数量，IC50VS正常组(NC)，IC50VS NC，IC50VS IC10分别是451、470、150个。
3、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞三组在GO、KEGG PATHWAY、PPI均存在一定影响。
4、伊马替尼及尼罗替尼多克隆抗体特异性较差，拉帕替尼多克隆抗体特异性较好并建立成功标准曲线。
结论：
1、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要表现在干扰氮类化合物的生物合成过程;影响各细胞组分，如细胞器、囊泡、线粒体;干扰各种分子结合功能。
2、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要影响了是代谢、核糖体和氧化磷酸化通路。
3、青蒿琥酯作用于LLC-PK1细胞，主要的节点蛋白数量IC50VS NC，IC50VS NC，IC50VS IC10分别是38、40、40个。
4、青蒿琥酯对LLC-PK1细胞的潜在机制可能是产生氧化胁迫，影响细胞损伤或坏死。