低剂量X线照射通过上调血管内皮生长因子的表达促进骨痂微血管新生而加速骨痂矿化

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目的:本研究拟通过探讨低剂量X线照射(LDI)对大鼠骨折模型中血管新生和血管内皮生长因子(VEGF)的影响,来解释其促进大鼠骨痂矿化的机理。方法:176只雄性SD大鼠(体重230±20 g)随机分为实验组和对照组,每组88只。制作标准的右侧股骨中段闭合骨折模型,实验组立即采用医用直线加速器对大鼠进行总量为1Gy的低剂量全身照射,对照组不予照射。术后1、2、3、4周处死大鼠取血清和股骨标本。每组每个时间点随机选择6只大鼠行腹主动脉远端血管造影后,使用MicroCT断层扫描标本,并选取同一兴趣区测定血管体积、体积分数和血管平均直径。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中VEGF含量。RT-PCR和Western-blot法测定骨痂内的VEGF mRNA及VEGF蛋白的表达。免疫组织化学染色法测定骨痂处CD31、CD34、VEGF和VEGFR2的表达。结果:术后第1周,实验组较对照组的血管体积总量和体积分数值低,但术后第2周,实验组血管体积总量及血管体积分数明显高于对照组(p<0.05)。两组血清VEGF含量在骨折愈合期都是逐渐增高的,在术后第3周达到高峰,第4周已降低,但在术后第2和3周,实验组明显高于对照组(p<0.05)。两组VEGF mRNA及VEGF蛋白在骨折愈合期也都有表达,并分别在术后第2和3周达到高峰,而且此时,实验组也显著强于对照组(p<0.05)。免疫组织化学显示在术后第2和3周,实验组骨痂处的CD31、CD34、VEGF和VEGFR2表达强于对照组(p<0.05)。结论:LDI能上调VEGF的表达,从而能促进大鼠的血管新生,而这两者也是LDI促进骨痂矿化的原因,并且术后第2和3周可能是关键的作用时间点。
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