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目的:慢性鼻窦炎是（chronic rhinosinusitis,CRS）是指鼻窦黏膜的慢性炎症性疾病,临床表现为鼻堵,脓涕,嗅觉减退或丧失,头面部胀痛。CRS影响约10%的全球人口,表型上根据有无鼻息肉可分为伴有鼻息肉的CRS（CRSw NP）和不伴鼻息肉的CRS（CRSs NP）。CRSw NP常根据组织嗜酸性粒细胞的浸润程度分为嗜酸性粒细胞型CRSw NP（ECRSw NP）和非嗜酸性粒细胞型CRSw NP（n ECRSw NP）。ECRSw NP呈现显著的的2型T辅助细胞（Th）炎症,表现为幼稚CD4+T细胞分化为Th2细胞,组织嗜酸性粒细胞浸润增多,伴有白介素（IL）-4,IL-5,IL-13升高,且ECRSw NP患者常伴有过敏性鼻炎、哮喘等疾病,预后表现为高复发倾向。CRSw NP现有的治疗模式包括局部或全身性糖皮质激素和鼻内镜手术。但鼻息肉的反复复发导致患者需要长时间的激素治疗以及多次的内镜手术,这些都造成了不可忽视的风险,严重影响了患者的生活质量。因此,探究CRSw NP诊断及治疗的标志物对减轻其所造成的社会及经济负担至关重要。长链非编码RNA（lnc RNAs）是长度超过200 nt的RNA,参与转录调控、转录后调控、细胞器和结构组织以及基因组完整性等多种细胞过程。转移相关肺腺癌转录本1（MALAT1）是lnc RNAs的重要成员,位于11q13.1,有8700个核苷酸,其首次在非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma,NSCLC）中发现,参与调节细胞周期和迁移。MALAT1是一种哺乳动物中高度保守的lnc RNA,在人类多种组织和细胞中表达,具有明显的组织特异性和时间性表达模式。MALAT1在转录和细胞周期调节、表观遗传学、炎症和肿瘤转移中起着关键作用。目前对MALAT1的研究主要集中于肿瘤方面,研究表明,其在头颈部恶性肿瘤、肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌以及其他恶性肿瘤中表达失调,其表达与肿瘤大小、分期、预后密切相关,可用于评价肿瘤患者的临床病理特征及预后。多项研究表明,lnc RNAs参与Th1/Th2平衡的调节,且MALAT1通过海绵化miR-155参与调节哮喘患者CD4+T细胞内Th1/Th2平衡。MALAT1在不同亚型CRSw NP中显著低表达,可能参与CRSw NP的调控,其具体机制有待进一步分析。综上所述,当前的研究表明,lnc RNA MALAT1参与CRSw NP调控,其是否通过调节Th1/Th2平衡发挥作用及具体机制有待进一步研究。本研究探究了MALAT1对CRSw NP患者鼻息肉组织Th1/Th2平衡的影响及机制,为CRSw NP的早期诊断及相关治疗药物的开发提供理论依据。研究方法:一、MALAT1在慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者中表达及对Th1/Th2平衡的影响收集20例CRSw NP患者的鼻息肉组织作为实验组,其中n ECRSw NP和ECRSw NP各10例,9例鼻中隔偏曲患者代偿性肥大或泡状中鼻甲的黏膜组织作为对照组,统计临床资料。通过qRT-PCR和Western blot检测组织中Th1细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达;通过流式细胞术检测组织及外周血中CD4+IFN-γ+Th1细胞比例和CD4+IL-4+Th2细胞比例;通过qRT-PCR检测组织中MALAT1表达水平。分离培养ECRSw NP患者鼻息肉组织中CD4+T细胞,将细胞分为两组,分别转染阴性对照和MALAT1 siRNA。通过qRT-PCR检测细胞Th1细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13 m RNA表达;通过Western blot检测细胞Th1细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13蛋白表达水平;通过流式细胞术检测细胞CD4+IFN-γ+Th1细胞比例和CD4+IL-4+Th2细胞比例。二、MALAT1通过靶向结合miR-155-5p调节GATA3表达影响嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉Th1/Th2平衡生物信息学在线数据库预测MALAT1及GATA3 m RNA与miR-155-5p的潜在结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验、AGO2-RIP和MS2-RIP验证MALAT1和miR-155-5p及GATA3 m RNA和miR-155-5p之间的靶向关系。通过qRT-PCR检测n ECRSw NP和ECRSw NP患者的鼻息肉组织及作为对照组的中鼻甲黏膜组织中miR-155-5p和GATA3 m RNA表达水平;通过Western blot检测组织中GATA3蛋白表达水平;通过Spearman相关性分析检测CRSw NP患者的鼻息肉组织MALAT1与miR-155-5p、MALAT1与GATA3及miR-155-5p与GATA3间表达相关性。分离培养ECRSw NP患者鼻息肉组织中CD4+T细胞,将细胞分为六组,分别转染阴性对照、MALAT1 siRNA、MALAT1 siRNA+抑制剂阴性对照、MALAT1 siRNA+miR-155-5p抑制剂、MALAT1 siRNA+miR-155-5p抑制剂+阴性对照和MALAT1 siRNA+miR-155-5p抑制剂+GATA3 siRNA。通过qRT-PCR和Western blot检测细胞Th1细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达;通过流式细胞术检测细胞CD4+IFN-γ+Th1细胞比例和CD4+IL-4+Th2细胞比例。结果:一、MALAT1在慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者中表达及对Th1/Th2平衡的影响临床数据表明ECRSw NP组的外周血嗜酸性粒细胞计数及嗜酸性粒细胞比例显著升高,与n ECRSw NP组和对照组相比有统计学差异;ECRSw NP组和n ECRSw NP组的Lund-Mackay CT评分及Lund-Kennedy评分与对照组相比显著增高,但二者之间无显著性差异;三组在年龄、性别、身高、体重、BMI、是否吸烟、是否合并哮喘、是否合并过敏性鼻炎、Fn NO、Fe NO方面进行比较,差异均无统计学差异。n ECRSw NP和ECRSw NP患者鼻息肉组织中Th1细胞相关因子IFN-γ和IL-2 m RNA和蛋白表达及CD4+IFN-γ+Th1细胞比例上调,MALAT1表达下调,且ECRSw NP患者较n ECRSw NP患者鼻息肉组织中IFN-γ和IL-2 m RNA和蛋白表达及CD4+IFN-γ+Th1细胞比例下调,MALAT1表达上调,ECRSw NP患者鼻息肉组织中Th2细胞相关因子IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达及CD4+IL-4+Th2细胞比例上调;沉默MALAT1增加ECRSw NP患者鼻息肉组织CD4+T细胞IFN-γ和IL-2 m RNA和蛋白表达及CD4+IFN-γ+Th1细胞比例,降低CD4+T细胞IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达及CD4+IL-4+Th2细胞比例。二、MALAT1通过靶向结合miR-155-5p调节GATA3表达影响嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉Th1/Th2平衡MALAT1和GATA3 m RNA存在miR-155-5p的潜在结合位点,且MALAT1和GATA3 m RNA与miR-155-5p结合。n ECRSw NP和ECRSw NP患者鼻息肉组织中miR-155-5p表达上调,且ECRSw NP患者较n ECRSw NP患者鼻息肉组织中miR-155-5p表达下调;ECRSw NP患者鼻息肉组织中GATA3 m RNA和蛋白表达上调。CRSw NP患者鼻息肉组织中MALAT1和miR-155-5p表达及GATA3 m RNA和miR-155-5p表达呈负相关,GATA3 m RNA和MALAT1表达呈正相关。转染miR-155-5p抑制剂降低沉默MALAT1的ECRSw NP患者鼻息肉组织CD4+T细胞IFN-γ和IL-2 m RNA和蛋白表达及CD4+IFN-γ+Th1细胞比例,增加CD4+T细胞IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达及CD4+IL-4+Th2细胞比例。沉默GATA3增加沉默MALAT1并给于miR-155-5p抑制剂的ECRSw NP患者鼻息肉组织CD4+T细胞IFN-γ和IL-2 m RNA和蛋白表达及CD4+IFN-γ+Th1细胞比例,降低CD4+T细胞IL-4、IL-5和IL-13 m RNA和蛋白表达及CD4+IL-4+Th2细胞比例。结论:MALAT1通过海绵化miR-155-5p上调GATA3表达促进嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻息肉组织Th2细胞偏移。