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目的:本实验试图通过观察佐剂型关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠的继发侧足趾肿胀度、胸腺指数、脾脏指数及踝关节病理形态学等的改变,来明确香椿子总多酚(Total Polyphenols from seeds of Toona sinensis,TSTP)对 AA大鼠是否有治疗作用;通过观察香椿子总多酚对炎性细胞因子和血管生长调节因子的影响,来探讨香椿子总多酚对 AA大鼠发挥治疗作用的可能机制。 方法:6周龄 Wistar大鼠50只,雌性,SPF级,体重160±20g,随机分为5组,每组10只:正常组、模型组、雷公藤甲素组、香椿子总多酚35mg组和香椿子总多酚70mg组。正常组在左后肢足垫部皮下注射0.1ml生理盐水,其余组在左后肢足垫部皮下注射0.1ml弗氏完全佐剂(complete Freunds adjuvant,CFA)诱导建立大鼠佐剂型关节炎模型。大鼠致炎后第8天开始灌胃治疗,正常组和模型组均给予0.5％羧甲基纤维素钠(10ml/kg)、雷公藤甲素组给予雷公藤甲素(20mg/kg)、香椿子总多酚35mg组给予香椿子总多酚(35mg/kg)、香椿子总多酚70mg组给予香椿子总多酚(70mg/kg),一天一次,连续灌胃21天。大鼠于致炎前(d0)、致炎后第4、8、12、16、20、24、28天(d4、d8、d12、d16、d20、d24、d28)分别在足容积测量仪上测定右侧(非致炎侧)足容积,d4、d8、d12、d16、d20、d24、d28与 d0足容积的差值即为该时大鼠足趾肿胀度。最后一次灌胃结束2小时后,处理大鼠,腹主动脉取血,采用ELISA法检测血清中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和内皮抑素(endostatin,ES)的表达水平,同时摘取胸腺和脾脏组织并称重,计算胸腺指数和脾脏指数。并于踝关节上方0.5cm剪取踝关节,采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法制作成病理组织切片,用以观察形态学的相关改变。 结果:与正常组相比较,模型组大鼠的继发侧足趾肿胀度、胸腺指数及脾脏指数显著升高;踝关节可见明显的病理学改变:滑膜组织充血水肿,滑膜细胞增生,排列紊乱,关节腔内及周围组织有大量的炎性细胞浸润,关节软骨受损、破坏,伴有血管翳形成;血清中炎性细胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α和促血管生成因子 VEGF的表达水平明显升高,而抗炎细胞因子 IL-10和抑血管生成因子 ES的表达水平明显降低。与模型组相比较,35mg和70mg香椿子总多酚均明显降低 CFA诱导的大鼠继发侧足趾肿胀度、胸腺指数及脾脏指数;改善踝关节的病理组织形态:滑膜增生程度减轻,关节腔及周围组织炎性浸润减少,关节软骨破坏程度减轻;下调血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF的表达水平,上调 IL-10和ES的表达水平。 结论:(1)香椿子总多酚能够降低AA大鼠的继发侧足趾肿胀度、胸腺指数及脾脏指数,改善踝关节病理组织形态,表明香椿子总多酚具有治疗大鼠AA的作用。 (2)香椿子总多酚能够降低AA大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平,升高抗炎细胞因子IL-10的表达水平,改善炎性细胞因子和抗炎细胞因子的失衡,表明香椿子总多酚可能通过抗炎治疗大鼠AA。 (3)香椿子总多酚能够降低AA大鼠血清中促血管生长因子VEGF的表达水平,升高抑血管生长因子ES的表达水平,改善促血管生长因子和抑血管生长因子的失衡,表明香椿子总多酚可能通过抑制血管翳形成发挥对大鼠AA的治疗作用。