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目的研究急性白血病(acute myeloid leukemia,AL)患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中唯BH3域自噬蛋白(BH3-only domain autophagy protein,Beclinl)、微管相关蛋白1轻链(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、色氨酸/天冬氨酸重复域磷脂结合蛋白1(WD repeat domain phosphoinositide-interacting protein 1,WIPI1)、自噬相关基因16(autophagy related gene16,ATG16)基因表达情况和LC3B蛋白表达情况,结合单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染料对骨髓单个核细胞进行荧光染色,探讨自噬与急性白血病之间的关系,揭示细胞自噬活动在急性白血病肿瘤逃逸机制中所发挥的作用,为急性白血病早期诊断和后期治疗提供新思路。方法收集广西医科大学第一附属医院2016年1月至2016年7月期间的骨髓标本94例。66例急性白血病病人骨髓为实验组,男37例,女29例,病人年龄在3至75岁之间,中位年龄为43岁。急性白血病患者均为初治,并未接受放疗和化疗。AL诊断及分型参照MICM分型。以非肿瘤性疾病患者(巨幼细胞贫血,缺铁性贫血患者)骨髓标本28例为对照组,年龄范围在18至73岁,其中男14例,女14例,中位年龄为45岁。利用淋巴胞分离液分离出骨髓单个核细胞,经单丹磺酰尸胺染色、固定后制备玻片,于荧光显微镜观察细胞的自噬现象,并计数阳性细胞数。采用逆转录聚合酶连反应(reverse transcribe polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测自噬基因Beclinl和LC3 mRNA的表达情况,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)技术检测自噬基因WIPI1和ATG16 mRNA的表达水平,利用免疫印记法(western blot,WB)技术和免疫荧光技术检测LC3B蛋白表达情况,并分析LC3B蛋白表达水平与急性白血病的关系。采用两独立样本t检验、卡方检验分析组间表达差异,检测水准a=0.050。结果1.荧光显微镜下观察到初治急性白血病患者细胞单丹磺酰尸胺染色阳性率高于对照组,且阳性细胞荧光程度较强,提示自噬现象较常见,对照组自噬现象较少见,计数发现,急性白血病组和对照组的自噬率分别为:(12.21±2.74)%,(2.43±0.91)%,P=0.000,P<0.05,差异具有统计学意义,急性白血病组阳性率高于对照组。2.Beclin1 mRNA表达水平:急性白血病组和对照组的相对表达量分别是0.50±0.11,0.38±0.11,P=0.000,P<0.05,差异具有统计学意义,急性白血病组Beclin1 mRNA表达高于对照组。3.LC3 mRNA表达水平:急性白血病组和对照组的相对表达量分别是0.47±0.13,0.38±0.09,P=0.002,P<0.05,差异具有统计学意义,急性白血病组LC3 mRNA表达高于对照组。4.WIPI1 mRNA急性白血病组和对照组的相对表达量分别是2.00±2.84,5.00±4.54,P=0.003,P值<0.005,差异具有统计学意义,急性白血病组WIPI1 mRNA表达低于对照组。5.ATG16 mRNA急性白血病组和对照组的相对表达量分别是,2.00±3.75,1.69±1.17,P=0.662,P值>0.05,差异不具有统计学意义。6.LC3B的蛋白表达情况:实验组和对照组LC3II表达量分别为0.5±0.12,0.11±0.06,P值<0.05,急性白血病组LC3II表达高于对照组。结论1.Beclin1和LC3 mRNA在急性白血病组患者中表达明显高于对照组,提示细胞Beclin1和LC3 mRNA表达异常可能与急性白血病的发生有关。2.细胞自噬活性增强可能与急性白血病的发生有关。