中药饲料添加剂因其能提高动物生产性能、无污染、无残留等优势,近年来在养殖业中被广泛应用。但调查发现,市场上销售的中药饲料添加剂有时会非法添加化学物质。本研究根据近年来国内中药饲料添加剂的非法添加情况,选取催情散、保胎无忧散、健胃散、降脂增蛋散共4种中药饲料添加剂,对其中可能添加的雌二醇等7种非法添加物,采用高效液相色谱(HPLC)法在相同的条件下进行检测。检测方法建立如:(1)色谱条件采用C18色谱柱(250 mm*4.6 mm,5 μm),梯度洗脱流动相A:水,流动相B:乙腈,柱温40℃,检测波长为230nm,流速为1.0 min。采用该HPLC条件,对7种化学成分进行专属性、线性关系、检测限和定量限、精密度以及添加回收试验的测定。(2)方法验证性试验在上述色谱条件下,7种化学物质能够被分离,且都为单一物质峰,呋喃西林、呋喃妥因、硝呋酚酰肼、雌三醇、雌二醇、雌酮、双烯雌酚的出峰保留时间依次为:6.853 min、10.170 min、15.770 min、16.097 min、20.455 min、22.263 min、23.043 min;所检测的成分线性关系良好(r>0.9992);7种化学成分在不同样品中的平均加样回收率和相对标准差(RSD)分别为:100.5%-103.04%、3.6%-4.8%;100.7%-102.4%、1.7%-2.6%;103.3%-104.6%、1.5%-2.3%;101.3%-%-102.9%、1.7%-2.7%;精密度、稳定性、重复性考察也符合分析要求。结论:本研究成功建立了同时检测4种中药饲料添加剂中非法添加7种化学物质的HPLC方法。该方法可在相同色谱条件下同时检测多种化学物质,与已有的检测方法相比,简化了检测程序,且精密度和稳定性良好。