本试验以金花茶成年植株的茎段为外植体,进行了比较系统的离体器官发生和体细胞胚胎发生研究,并采用SDS-PAGE方法分析了体胚发生过程中蛋白质组分变化。主要研究结果如下: 1.建立了金花茶成年茎段离体器官发生再生体系。试验结果表明:分段消毒法是较为理想的消毒方式;附加2mg·L^-1BA及0.5mg·L^-1IAA的改良WPM培养基适合诱导腋芽萌发,萌发率达57.1%;芽苗在附加3mg·L^-1BA及0.2mg·L^-1IAA的改良WPM培养基上增殖效果较好;在附加4mg·L^-1或6mg·L^-1NAA的1/2MS培养基上可诱导芽苗生根。 2.首次从金花茶成年茎段诱导体胚发生,建立了循环的体胚增殖系统、体胚成熟与萌发处理方法。 金花茶成年植株茎段在附加2mg·L^-1BA和0.5mg·L^-1NAA的MS培养基上培养80d后直接产生体胚,并以形成次生胚的方式增殖。 金花茶体胚增殖系统的维持有3条途径:①途径Ⅰ:可以进行球形胚发育及早期子叶胚的继代增殖,但继代增殖次数有限;②途径Ⅱ:可以进行除球形胚以外各类体胚的长期继代增殖,增殖率较高,但体胚高度不同步化;③途径Ⅲ:可以进行大子叶胚的长期继代增殖,次生胚大都处于大子叶胚阶段。实现这3条途径的最佳培养基分别为:改良ER+0.7mg·L^-12,4-D+30g·L^-1蔗糖;改良ER+0.1mg·L^-1NAA+3mg·L^-1BA+30g·L^-1山梨醇;MS+40g·L^-1蔗糖+20g·L^-1山梨醇。3条增殖途径相互联系,会形成一个循环的体胚增殖系统,能够长期维持。 金花茶体胚成熟要分两步进行。首先,小子叶胚在附加40g·L^-1蔗