慢性粒细胞性白血病（chronic myeloid leukemia，CML），是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病。在我国其在白血病中约占20％，年发病率1/10~5人口，仅次于急粒及急淋而居第三位。绝大多数CML具有特征的Ph染色体。Ph染色体是9号和22号染色体之间的相互易位，即t（9；22）（q34；q11），使位于第9号染色体q34的abl基因与第22号染色体q11的bcr形成了bcr-abl融合基因（5’-3’），其编码的BCR-ABL融合蛋白分子量为210KDa，具有异常的酪氨酸激酶活性。研究表明，BCR-ABL蛋白激酶可诱发多条信号转导通路的异常激活（简称BCR-ABL通路），引起细胞过度增殖，凋亡受抑以及粘附特性的改变，最终导致细胞的恶性转化。在BCR-ABL通路中CRKL作为BCR-ABL激酶的重要底物之一，以持续酪氨酸磷酸化状态存在，通过其SH2、SH3结构域（src homology 2 and 3 domain）募集各路信号转导分子，起着信号开关的作用，在BCR-ABL转化中扮演重要角色。但在正常造血细胞中CRKL通常以非磷酸化状态存在，不参与上述通路。 近年来CRKL基因在CML发病中的作用日益受到重视，已成研究CML的新热点。我们应用反义寡核苷酸技术，以阳离子脂质体作为转染载体，设计并合成了1个针对CRKL基因翻译起始部位的反义寡核苷酸 第四罕医人学项士研究生学住论文 （CRKL－ASODN），作用于体外培养的 CML细胞系 K562，通过’H－TdR掺入、流式细胞仪检测、电镜、RT－PCR等试验，从细胞增殖与凋亡的角度探讨了CRKL基因在CML发病中的作用及其临床应用。结果表明： ①Clthl基因反义寡核昔酸可以抑制K562细胞的增殖活性。’H－TdR试验、流式细胞仪检测显示其抑制效应，并且表明抑制随时间的延长而加深，抑制率最大值为69．8％： ②CKKL基因反义寡核音酸诱导K562细胞凋亡。反义寡核昔酸作用48h的K562细胞在电镜下呈现出凋亡各阶段的形态学改变。流式细胞仪检测显示一亚二倍体峰一凋亡峰。 ③CngL基因反义寡核苦酸特异地抑制CRKL基因的mRNA的表达。RT－PCR检测显示反义寡核昔酸作用72h的K562细胞的CRKL mgyA量比对照组及P－actin的mRNA量明显减少。 ④脂质体为载体可促进K562细胞对反义寡核昔酸的摄取。用Q－’‘S标记ASODN表明K562细胞对ASODN加脂质体组的摄取明显大于不加脂质体组。 本文证明CRKL基因分别从增殖和凋亡两个方面参与CML的发病，从而进一步阐明了CML发病的分子生物学机制，为CML的治疗提供了新思路。