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慢性胰腺炎(chronic pancreatitis CP)是在各种复杂原因的作用下所造成的胰腺组织及其功能的持续性损伤,与急性胰腺炎相比,慢性胰腺炎的基本特点为胰腺组织的基本结构发生永久性不可逆性改变以及广泛的组织纤维化。慢性胰腺炎在西方国家是一种多发病,在我国发病率比较低,但近年来发病率也有上升的趋势。明确慢性胰腺炎发病机制有助于慢性胰腺炎的早期诊断及治疗。近年来的研究相继发现了胰蛋白酶原基因(PRSS-1)突变、囊性纤维化跨膜转导调节基因(CFTR)突变与某些类型慢性胰腺炎的发病相关,证实了基因多态性是慢性胰腺炎发病的危险因素。目的本研究通过分析丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal1型(SPINK1)基因N34S突变在慢性胆源性胰腺炎、慢性酒精性胰腺炎、慢性特发性胰腺炎和自身免疫性胰腺炎患者中的发生率,对各组基因突变情况与正常对照组突变情况进行比较,探讨SPINK1基因突变对不同类型慢性胰腺炎易感性的影响,研究该基因突变是否为慢性胰腺炎发病的危险因素。进一步验证和探讨慢性胰腺炎发病的分子机制。方法在患者知情同意的情况下,采集2010年-2012年河南省人民医院明确诊断的79例慢性胰腺炎住院患者血液标本,其中包括慢性胆源性胰腺炎27例,慢性酒精性胰腺炎23例,慢性特发性胰腺炎24例,自身免疫性胰腺炎5例,同时采集60例健康对照者的血液标本,提取基因组DNA,应用PCR技术对SPINK1基因进行扩增、酶切,观察DNA片段多态性,并选取病例组及体检对照组日的基因分别进行测序,观察碱基突变情况。结果患者组及对照组139份标本共检测到6例SPINK基因N34S突变,其中24例特发性胰腺炎检测出4例,突变发生率为16.7%,27例胆源性胰腺炎检测出该基因突变1例,突变发生率为3.7%,23例酒精性胰腺炎检出1例,突变发生率为4.3%,5例自身免疫性胰腺炎未检出该基因突变,60例健康对照组也没有检出该基因突变。PCR-RFLP(?)电泳结果显示由于突变的存在,使突变基因产生了新的限制性内切酶酶切位点,突变组基因被切为大小不同的两个片段,凝胶电泳图上出现新的条带。选取其中突变病例突变基因及正常对照基因进行测序,发现SPINK1基因第101位存在A→G的突变,突变组杂合株的测序图上出现两个荧光条带。结论从总体上看,慢性胰腺炎患者组SPINK1基因N34S突变率为7.6%,高于健康对照组,从不同的慢性胰腺炎类型来看,特发性胰腺炎发生基因突变发生率与正常组对照差异最为显著,而胆源性胰腺炎、酒精性胰腺炎和自身免疫性胰腺炎患者该突变与健康对照组没有统计学差异。意义近年来,国内外学者对慢性胰腺炎的发病机制进行了深入的研究,相继发现了一些基因突变如胰蛋白酶原基因(PRSS-1)突变、囊性纤维化跨膜转导调节基因(CFTR)突变、丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal (?)型(SPINK1)基因等与某些类型慢性胰腺炎的发病相关,证实了基因多态性是慢性胰腺炎发病的危险因素。日本及欧洲学者对慢性特发性胰腺炎及慢性酒精性胰腺炎研究较多,而在我国占多数的慢性胆源性胰腺炎则鲜有研究。本研究对丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal Ⅰ型(SPINK1)基因N34S突变在我国的发生的情况以及其与各种慢性胰腺炎发病的相关性做了进一步的验证和探讨,特别是对我国多发的慢性胆源性胰腺炎也做了研究,结果显示慢性胆源性胰腺炎的发病与SPINK1基因N34S突变并没有统计学上的显著相关。此为本研究的创造性成果,为完善慢性胰腺炎的分子发病机制进一步补充了基于我国国情的依据。