姜黄素对与A549细胞共培养的肺成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制

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目的:明确姜黄素对与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞氧化应激水平的影响,进一步探讨姜黄素在防治肺纤维化方面可能的作用机制,寻求姜黄素干预肺纤维化的具体靶点。方法:将利用与A549细胞进行transwell跨室共培养的人胚肺成纤维细胞分为五组:对照组、TGF-β1(5ng/mL)刺激组、不同浓度姜黄素(5、10、20μM)进行干预的治疗组。应用ELISA法检测各组细胞培养上清液人肿瘤坏死因子;分光光度法检测细胞培养上清液丙二醛及超氧化物歧化酶水平:流式细胞仪测定细胞内的活性氧;western blot法检测核蛋白NF-κB以及APE/Ref-1的表达。结果:TGF-β1刺激组细胞人肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度、胞内活性氧(ROS)水平、上清液丙二醛浓度以及核内蛋白NF-κ B表达均明显升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)水平以及核内蛋白APE/Ref-1表达均明显下降(P<0.01),说明人胚肺成纤维细胞在TGF-β1刺激下氧化应激水平明显升高。不同浓度姜黄素干预后人肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度、胞内活性氧(ROS)水平、上清液丙二醛浓度以及核内蛋白NF-κ B表达均明显降低(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)水平以及核内蛋白APE/Ref-l表达均明显上升(P<0.01)。结论:低浓度的姜黄素能够降低TGF-β1刺激的与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞细胞氧化应激水平,并显著增加人胚肺成纤维细胞细胞核内抗氧化蛋白APE/Ref-1的表达,提示姜黄素可能通过降低氧化应激水平干预肺纤维化的发生、发展。
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